Как соединить пнд и полипропилен: Как соединить трубу пнд с полипропиленовой, металлической трубой

Содержание

Как соединить пнд трубу с полипропиленовой

Как соединить трубу пнд с полипропиленовой: виды и методы

Автор Фесенко Сергей, инженер На чтение 5 мин.

Новые инженерные системы все чаще создаются при использовании трубопроката из полипропилена и полиэтилена низкого давления. Нередко трубопроводы из ПП и ПНД приходится соединять между собой. Это позволяет не демонтировать уже проложенные коммуникации из полиэтилена низкого давления.

Поэтому полезно будет узнать, как соединить ПНД трубу с полипропиленовой трубой при модернизации и ремонте существующей сети. Информация особенно пригодится начинающим мастерам.

Виды стыковки

Популярный способ производства современных трубных изделий — использование стиролов. Материалы позволяют изготавливать прочные, устойчивые перед агрессивными средами трубопроводы.

Пластиковый водопровод

Они применяются при монтаже водопровода с горячей и холодной водой. При этом существует несколько методов стыковки пластикового трубопроката.

ПП трубопроводы

Трубопроводные полипропиленовые детали соединяются между собой с помощью пайки. В этом случае стыкуемые элементы системы нагреваются с помощью специального сварочного оборудования. Его обычно называют паяльников или утюгом.

Разогрев ПП деталей осуществляется до 260 градусов. Потом один элемент вставляется в другой. Свариваемый участок фиксируется в неподвижном положении, пока не произойдет остывание расплавленного полимера.

Стыковка с другими видами трубопроката выполняется при использовании специальных комбинированных муфт. Они представляют собой ПП изделия, с одной стороны которых впрессована металлическая втулка с наружной или внутренней резьбой.

Другой конец фитинга имеет вид патрубка из полипропилена. Именно эта часть спаивается с ПП трубой. Другая сторона муфты позволяет выполнить резьбовое соединение с трубопроводом из иного материала или с сантехнической арматурой.

Набор фитингов

Производители выпускают ПП комбинированные муфты с гранями под ключ. Такие фитинги сначала накручиваются или вкручиваются в трубопровод из другого материала, а потом свариваются специальным паяльником с ПП трубой.

Для стыковки разнородных труб также применяются американки. Это разборные соединительные элементы с накидной гайкой и уплотнительным материалам.

Они изготавливаются только из металла с резьбами на обоих концах или имеют с одной стороны патрубок из полипропилена. Американки затягиваются при минимальных усилиях.

ПНД трубопроводы

Участки трубопровода из полиэтилена низкого давления соединяются с помощью создания сварного шва или фитингов. Во втором случае герметичность стыка зависит от качества соединительных элементов и соблюдения технологии монтажа.

Монтаж водопровода

Сварной шов создается при использовании специального оборудования. Монтаж выполняется с помощью электромуфты или методом «стык в стык». Применение сварки подразумевает создание неразъемного соединения.

Чтобы стык можно было разобрать при необходимости, применяют специальные герметичные детали. Это недорогие ПНД фитинги многократного использования. В их конструкции присутствует прижимная гайка, от степени затягивания которой зависит герметичность соединения.

Производятся также специальные фитинги для соединения трубопроводов из разнородных материалов. Такие элементы на одном конце имеют резьбу, а другая их сторона представляет собой гладкий патрубок из ПНД с прижимной гайкой.

Существуют и другие варианты стыковки трубопроводов из разных материалов. Они будут описаны ниже.

Соединение труб ПНД и полипропиленовых между собой

Выполнить соединение ПНД и полипропиленовой трубы с помощью сварочного оборудования не получится. Смешивание разных полимеров станет причиной деформации стыка из-за появления трещин. Для соединения разнородных материалов применяются другие способы.

Резьбовые фитинги

Для монтажа соединительного резьбового модуля на концах труб из полиэтилена и полипропилена применяется сварка. Специальное оборудование предназначено для расплавления полимера. Это позволяет получить монолитный шов.

Муфта резьбовая соединительная

В начале процесса соединительный элемент разбирается. Потом одна его часть припаивается к концу трубопровода из полипропилена, а другая половина соединяется при помощи сварки с полиэтиленовой частью.

Эти действия позволят создать стык, который при необходимости всегда можно будет разобрать. Если же нужно выполнить неразъемное соединение, применяются специальные модули с закладными нагревающимися деталями.

Цанговые муфты

Для создания разборного стыка между отводами из ПП и ПНД применяются цанговые муфты. В состав такого модуля входит цанга, зажимная гайка, стопорное кольцо, резьба и ответная часть.

Цанговая муфта

Производители выпускают разные виды цанговых муфт. В начале процесса каждая из них разбирается. Потом цанга вставляется в полиэтиленовую трубу и зажимается стопорным кольцом при затягивании гайки без лишних усилий. В противном случае может лопнуть прижимной модуль или произойдет деформация края трубы.

На следующем этапе ответная часть цанговой муфты фиксируется паяльником на полипропиленовом трубопроводе. В завершение выполняется резьбовое соединение при использовании фум ленты, которая исключает возникновение протечек.

Фланцы

Распространенным способом соединения полипропиленовых труб с трубопроводами из полиэтилена низкого давления является использование фланцев.

Муфта соединительная фланцевая

Такие трубопроводные элементы применяются для стыковки коммуникаций большого диаметра. Дополнительно в работе используется втулка, позволяющая провести фиксацию фланцев.

Стыковка выполняет поэтапно:

втулки привариваются к концам разных труб/соединяются прижимной гайкой;
фланцы разъединяются;
соединительные элементы фиксируются на приваренных втулках;
фланцы соединяются между собой при помощи болтов и гаек.

Они выдерживают механические воздействия, перепады температуры и устойчивы перед коррозией.

Вывод и видео по теме

Видео поможет понять, как соединить трубу ПНД с полипропиленовым трубопроводом. Для этого можно использовать разные способы. Подходящий выбирается, исходя из условий монтажа, особенностей коммуникации и доступности материалов.

Мне нравится9Не нравится

Как подключить трубу мон. с полипропиленом

Нередко встречаются случаи, когда при изготовлении трубопровода приходится сталкиваться с проблемой соединения труб из разных материалов. В этой статье мы рассмотрим, как соединить трубу ПНД с трубой полипропиленовой.

Типы соединения полипропиленовых труб

Для соединения полипропиленовых труб с другими типами труб используются специальные фитинги с резьбой. Одна сторона фитинга приваривается к полипропиленовой трубе, а другая сторона с резьбой присоединяется к тому же диаметру с резьбой на другой трубе.Резьба на фитинге может быть внутренней или внешней. Также существуют комбинированные муфты. Мы рассмотрим их позже.

Другой тип соединения полипропиленовых труб основан на фланцевом соединении. Этот тип соединения используется в трубах большого диаметра. Для крепления фланца к полипропиленовой трубе приваривается втулка, на которую затем надевается фланец. Другой вариант монтажа — заглушки на фланцы. Их устройство напоминает компрессионную муфту. Фланцевое соединение крепится к краям трубы того же диаметра и затягивается накидными гайками.

Типы соединений для труб ПНД

Труба ПНД имеет примерно такие же устройства для соединения. Самый распространенный — цанговое соединение. Для соединения труб используется муфта, у которой с одной стороны цанга, а с другой — резьба. Для закрепления муфты откручивается зажимная гайка и надевается на трубу ПНД. Цанга вставляется в трубу, зажимная гайка надевается и плотно затягивается.

Совет! Зажимную гайку нельзя зажимать очень туго, иначе она может лопнуть или цанга раздавит край трубы.

После присоединения цанги к другому концу резьбовой муфты можно навинтить другую трубу с резьбой того же диаметра.

Фланцевое соединение трубы ПНД выполняется аналогично описанному выше соединению. К краю трубы ПНД приваривается втулка, на которую крепится фланец. И такой же прибор с заглушкой-фланцем, где соединение устанавливается по краям труб и прижимается накидными гайками.

Соединение двух труб

С помощью описанных выше приспособлений для труб можно легко соединить трубу ПНД с полипропиленом.

В первом случае вы прикрепляете резьбовую цангу к трубе из ПНД и комбинированную резьбовую муфту к пропиленовой трубе. На резьбу наматывают ФУМ-ленту для герметизации и скручивания.
Во втором случае вы соединяете две трубы фланцами. Вставьте резиновую прокладку между фланцами для уплотнения и затяните их болтами.

Муфты комбинированные

Если с цанговым соединением для трубы ПНД все понятно, то комбинированные муфты (фитинги) для полипропиленовых труб разнообразны.Давайте быстро их рассмотрим:

Муфта с внутренней резьбой служит для соединения трубопровода с другим типом трубы или инструментами с внешней резьбой. Он состоит из полипропиленовой заготовки с запрессованной внутрь металлической муфтой, на которой внутри нарезана резьба.
Муфта с внешней резьбой выполняет те же функции, что описаны выше. Отличается только тем, что в полипропиленовую заготовку запрессовывается металлическая гильза с внешней резьбой.
Муфта с внутренней резьбой под ключ состоит из полипропиленовой заготовки, в которую запрессована металлическая втулка, выступающая металлическими краями над кромкой полипропилена. Торцы выполнены под рожковый ключ. Внутри вырезано лицо. Такую втулку удобно скручивать ключом на другую резьбу. Также есть модели муфт с торцами под ключ.
Наружная муфта «под ключ» такая же, как муфта, описанная в пункте 3, но имеет наружную резьбу.
Муфта разъемная с внутренней резьбой состоит из двух металлических частей под рожковый ключ. Причем одна металлическая деталь соединяется с полипропиленовой заготовкой. Такие муфты устанавливаются в местах, где необходимо отсоединить трубопровод или снять устройства.Другое название этого клатча — американское. Крутил его двумя ключами.
Муфта разъемная с наружной резьбой аналогична предыдущей типу американки. Единственное отличие — внешняя резьба вместо внутренней.
Муфта с накидной гайкой состоит из полипропиленовой заготовки, в которую запрессован фитинг с накидной гайкой. Устанавливается так же, как и американка: в места необходимого разъема трубопровода.

Эти комбинированные муфты, припаянные к полипропиленовой трубе, легко подсоединяются к трубе из ПНД, имеющей цангу с аналогичной резьбой.

Пайка фитингов из полипропилена

Перед соединением двух труб с фитингами их необходимо закрепить на трубе. Монтаж цанги на трубу ПНД мы обсуждали выше. Теперь рассмотрим соединение полипропиленовой трубы с фитингом.

Фитинги полипропиленовые соединяются пайкой специальным паяльником. Паяльник с насадками устанавливается на подставку и нагревается до 260 ^около

Системы трубопроводов из ПП — AGRU

ПП — Идеальный материал

PP — идеальный материал для использования на травильных заводах, в химической промышленности, а также для чрезвычайно агрессивных сточных вод, так как химические вещества используются при высоких температурах в этих областях. Ассортимент продукции AGRU включает различные типы полимеров ПП:

• Гомополимер ПП (PPH) , который состоит исключительно из молекул пропилена.
• Статистические сополимеры ПП (PPR) , полипропилен, в котором статистически распределенные мономеры этилена интегрированы в молекулярную цепь.
• Сополимер ПП (PPC) , блок-сополимер полипропилена, в котором мономеры этилена в блочной форме интегрированы в молекулярную цепь.

Все три типа пропилена очень термически стабильны, идеально совместимы и могут быть легко интегрированы во все стандартные сварочные процедуры согласно DVS 2207. Полуфабрикаты из серого полипропилена не устойчивы к УФ-излучению и поэтому требуют соответствующей защиты.

Полипропилен маловоспламеняющийся (ПП)

Полипропилен с низкой воспламеняемостью (ПП) — гомополимер ПП, содержащий антипирен.Следовательно, полипропилен может быть классифицирован как материал с более высокой огнестойкостью в соответствии с DIN 4102 и UL94. Низковоспламеняющийся и электропроводящий (PPs-el ESD) полипропилен изготовлен из сополимера PP и обладает как огнестойкими, так и электропроводящими / антистатическими свойствами. Поверхностное сопротивление ≤106 Ом, что предотвращает электростатический заряд. Продукция AGRU из полипропилена натуральный и белый (из полипропилена) дополняет наш обширный ассортимент продукции из полипропилена.

Что такое полипропиленовая труба? (с иллюстрациями)

Полипропиленовая труба используется во многих промышленных условиях из-за ее химической и термической стойкости, доступности и стоимости. Он часто используется в потоках отходов всех типов, в том числе в жилых и коммерческих помещениях. Побочный продукт перегонки нефтепродуктов, полипропилен был обнаружен в начале 1950-х годов, и из-за его относительно легкости производства его начали производить в течение семи лет. Этот эластичный материал, пригодный для вторичной переработки, часто находит новое применение.

Полипропиленовые трубы менее плотны и дешевле в транспортировке, чем металлические фитинги, такие как медные трубы.

Этот материал представляет собой термопласт с прямой цепью, состоящий из метильных групп на каждом втором углероде с эмпирической формулой C3H6.Полипропилен, используемый для труб, в основном изотатичен, в котором все метильные группы находятся в одном и том же положении на углеродной основе, что приводит к средней молекулярной массе и степени кристалличности между полиэтиленом низкой плотности (LDPE) и полиэтиленом высокой плотности ( HDPE). Благодаря этим свойствам трубы устойчивы к кислотам, щелочам и растворителям и превосходно подходят для транспортировки промышленных потоков между процессами. Материал окрашен в черный или серый цвет для уменьшения разрушения трубы и ее содержимого ультрафиолетовым светом.

Полипропиленовая труба может использоваться в суровых условиях.

Сильно едкие потоки, в том числе растворы гидроксида калия или гидроксида натрия, могут проходить по полипропиленовым трубам.Использование сварных швов позволяет избежать едкого воздействия на клеи на основе растворителей. Добавка в стекло необходима для того, чтобы полипропилен мог работать с биодизельным (метилолеатным) топливом. Этот тип труб не используется с концентрированными сильными окислителями, такими как азотная кислота.

Помимо суровых условий окружающей среды, полипропиленовые трубы используются для транспортировки дистиллированной воды во всех случаях, кроме самых строгих.Отсутствие реакционной способности трубы и возможность сварки плавлением соединений без использования клея обеспечивает чистоту воды. Трубку можно использовать в системах с повышенным давлением до 150 ° F (65 ° C) и до 180 ° F (82 ° C) без давления. Без модификации использование трубы ограничено до 20 фунтов на квадратный дюйм (138 кПа). К другим жидкостным применениям относятся отопление и охлаждение зданий, что является экономичной альтернативой использованию воздуха в качестве теплоносителя.

Полипропилен производится из низкомолекулярных компонентов природного газа или побочных продуктов перегонки нефти с использованием хромовых катализаторов при низком давлении, что является более дешевым процессом, чем HDPE.Поскольку полипропиленовая труба менее плотна, чем другие термопласты, и, безусловно, намного менее плотна, чем стальные, железные или медные трубы, транспортные расходы ниже. Трубы из полипропилена подлежат вторичной переработке и имеют срок службы около 50 лет.

Труба не проводит электричество — еще одно преимущество перед металлическими трубами в промышленных условиях.Домовладельцы иногда считают, что полипропиленовые трубы в системах бытовых сточных вод работают бесшумно из-за их естественных изоляционных свойств. Сама полипропиленовая труба очень прочная и не раскалывается. На ипподромах для картинга и подобных местах полипропиленовая труба часто используется в качестве недорогого барьера или ограждения из-за ее способности выдерживать нагрузки и экстремальные температуры.

прямых штуцеров трубы полипропилена Хдпе Ппр уменьшая тройник

Тип:: Тройник

Материал:: PPR

Размер трубы:

0 штук выбрано, всего $ США

Посмотреть детали

Стоимость доставки:: Зависит от количества заказа.

Время выполнения:: 10 дней после получения оплаты

Образцы: 0,17 $ / шт., 1 шт. (Минимальный заказ): Купить образцы .

Как соединить трубы пнд и полипропилен

Как соединить трубу пнд с полипропиленовой: виды и методы

Автор Фесенко Сергей, инженер На чтение 5 мин.

Виды стыковки

Пластиковый водопровод

ПП трубопроводы

Разогрев ПП деталей осуществляется до 260 градусов. Потом один элемент вставляется в другой. Свариваемый участок фиксируется в неподвижном положении, пока не произойдет остывание расплавленного полимера.

Набор фитингов

Для стыковки разнородных труб также применяются американки.

Это разборные соединительные элементы с накидной гайкой и уплотнительным материалам.

ПНД трубопроводы

Монтаж водопровода

Существуют и другие варианты стыковки трубопроводов из разных материалов. Они будут описаны ниже.

Соединение труб ПНД и полипропиленовых между собой

Резьбовые фитинги

Муфта резьбовая соединительная

Эти действия позволят создать стык, который при необходимости всегда можно будет разобрать. Если же нужно выполнить неразъемное соединение, применяются специальные модули с закладными нагревающимися деталями.

Цанговые муфты

Цанговая муфта

Фланцы

Муфта соединительная фланцевая

Стыковка выполняет поэтапно:

втулки привариваются к концам разных труб/соединяются прижимной гайкой;
фланцы разъединяются;
соединительные элементы фиксируются на приваренных втулках;
фланцы соединяются между собой при помощи болтов и гаек.

Во время создания стыка используется уплотнительный материал. Это прокладка из резины. Она вставляется между фланцами, представляющими собой прочные металлические детали. Они выдерживают механические воздействия, перепады температуры и устойчивы перед коррозией.

Вывод и видео по теме

Мне нравится9Не нравится

Системы трубопроводов из ПП — AGRU

ПП — Идеальный материал

PP — идеальный материал для использования на травильных заводах, в химической промышленности, а также для чрезвычайно агрессивных сточных вод, поскольку химические вещества используются при высоких температурах в этих областях. Ассортимент продукции AGRU включает различные типы полимеров ПП:

• Гомополимер ПП (PPH) , который состоит исключительно из молекул пропилена.
• Статистические сополимеры PP (PPR) , полипропилен, в котором статистически распределенные мономеры этилена интегрированы в молекулярную цепь.
• Сополимер PP (PPC) , блок-сополимер полипропилена, в котором мономеры этилена в блочной форме интегрированы в молекулярную цепь.

Все три типа пропилена очень термически стабильны, идеально совместимы и могут быть легко интегрированы во все стандартные сварочные процедуры согласно DVS 2207. Полуфабрикаты из серого полипропилена не устойчивы к УФ-излучению и поэтому нуждаются в соответствующей защите.

Полипропилен маловоспламеняющийся (ПП)

Размеры полипропиленовых труб Цена Белые трубы и фитинги из ППР

Описание продукта

Размеры полипропиленовых труб цена Белые полипропиленовые трубы и фитинги

Детали:

полипропиленовые трубы

Название	PPR Труба,
Материал	полипропилен Случайно (100% New Materail PPR)
Размер	DN20 мм-160 мм (1/2 » — 4 »)
Бесплатный образец	ДА
Цвет	Зеленый / Серый / Белый / Синий / Настроить
Стандарт	ISO / DIN / TSE / CSTB / AENOR
Детали упаковки	PPR ТРУБА: Вставки и пакеты
OEM Service	Богатый опыт более 20 лет

Спецификация:

Китайские подземные полипропиленовые трубы и фитинги для горячей воды

Q: В чем заключается ваша MOQ?
A: По запросу клиента.

Q: Почему выбирают нас?
A: Мы являемся профессионалом и лидером в производстве труб из полиэтилена высокой плотности, мы предлагаем комплексные услуги для трубопроводных систем с конкурентоспособной ценой и быстрым сроком поставки, и мы гарантируем, что наше качество не имеет себе равных.

Q: Как купить товар?
A: Свяжитесь с нами по электронной почте или через торгового менеджера и сообщите нам, какой продукт и в каком количестве вам нужен, мы немедленно свяжемся с вами.Больше уточняйте ту информацию, которую вы предоставили, быстрее и проще вы получите расценки.

В: Могу ли я сделать свой собственный дизайн и логотип на продукте?
A: Да, мы делаем OEM. Добро пожаловать в глобальный партнер, мы можем сделать ваш продукт в Китае.

Q: Какой срок оплаты?
A: Сумма заказа Сумма заказа> = 1,000USD, 30% T / T заранее, баланс перед отправкой.
Сумма заказа> 20,000 долларов США, 30% T / T заранее, баланс L / C в виде приемлемого.
Сумма заказа> 100000 долларов США, приемлемо 100% аккредитив в предъявлении.

В: Остались вопросы?
A: Воспользуйтесь приведенной ниже таблицей и отправьте нам свои вопросы. Спасибо.

полипропиленовая труба и штуцеры Ppr для холодной и горячей воды

Q: В чем заключается ваше MOQ?
A: По запросу клиента.

В: Остались вопросы?
A: Воспользуйтесь приведенной ниже таблицей и отправьте нам свои вопросы. Спасибо.

Производство полиэтиленовых труб – завод Трубопласт г. Тула

Используем современное оборудование Krauss Maffei Berstorff

производство полиэтиленовых труб

Доставка по всей России

СМОТРЕТЬ КАТАЛОГ

Используем современное оборудование Krauss Maffei Berstorff

производство полиэтиленовых труб

Доставка по всей России

СМОТРЕТЬ КАТАЛОГ

Используем современное оборудование Krauss Maffei Berstorff

производство полиэтиленовых труб

Доставка по всей России

СМОТРЕТЬ КАТАЛОГ

Каталог продукции

Труба пнд водопроводная

Трубы пнд для холодного водоснабжения производятся из ПЭ100 по ГОСТ18599-2001: для хозяйственно- питьевого водоснабжения. ..

Подробнее >>>

Труба пнд водопроводная

Трубы пнд для холодного водоснабжения производятся из ПЭ100 по ГОСТ18599-2001: для хозяйственно- питьевого водоснабжения. Широко применяются, в том числе для организации напорных систем полива и орошения. Описание: черные с синей полоской, дополнительно труба маркируется, как питьевая. Цена за метр.

Заказать >>>

Труба пнд газовая

Газовые пнд трубы производятся из ПЭ100 по ГОСТ Р 58121.2-2018: трубы из полиэтилена для газопроводов. Описание: черные …

Подробнее >>>

Труба пнд газовая

Газовые пнд трубы производятся из ПЭ100 по ГОСТ Р 58121.2-2018: трубы из полиэтилена для газопроводов. Описание: черные с желтой полоской и полной маркировкой согласно ГОСТа. Цена за метр.

Заказать >>>

Труба пнд техническая

Электротехнические трубы различных диаметров., трубы пнд для кабеля или системы вентеляции, трубы для систем безнапорног…

Подробнее >>>

Труба пнд техническая

Электротехнические трубы различных диаметров., трубы пнд для кабеля или системы вентеляции, трубы для систем безнапорного орошения и полива — производятся различных диаметров и размеров. Характеристики: гладкая труба. Данные типы полиэтиленовых труб можем произвести, как в стандартном черном цвете, так и любого другого цвета. Цена за метр.

Заказать >>>

Труба пнд канализационная

Канализационные трубы пнд производятся в различных размерах, как для напорной, так и для безнапорной системы. ПЭ трубы д…

Подробнее >>>

Труба пнд канализационная

Канализационные трубы пнд производятся в различных размерах, как для напорной, так и для безнапорной системы. ПЭ трубы для канализации производятся нами черного цвета. Для напорных систем- синяя полоска. Для безнапорных систем без полоски, либо возможно производство с любой полоской, кроме: желтой, синей, красной.

Заказать >>>

Труба пнд для скважины

Обсадная труба пнд производится не только самых популярных диаметров 32, 110, но и любых других. Характерные особенности…

Подробнее >>>

Труба пнд для скважины

Обсадная труба пнд производится не только самых популярных диаметров 32, 110, но и любых других. Характерные особенности: резьба для соединения. Цвет трубы пнд для скважины: моно голубой.

Заказать >>>

Труба пнд дренажная

Данная полиэтиленовая труба для дренажа производится из трубы пнд с назначением «вода», при помощи дополнительного техно…

Подробнее >>>

Труба пнд дренажная

Данная полиэтиленовая труба для дренажа производится из трубы пнд с назначением «вода», при помощи дополнительного технологического этапа: пропилы отверстий для дренажа. Характеристики: гладкая труба с пропилами для дренажа., цвет – черный.

Заказать >>>

Труба PERT и полипропилен

Данные пластиковые трубы производятся для систем горячего водоснабжения. Труба из pe-rt и из полипропилена широко примен…

Подробнее >>>

Труба PERT и полипропилен

Данные пластиковые трубы производятся для систем горячего водоснабжения. Труба из pe-rt и из полипропилена широко применяется при обустройстве системы теплого пола. Стандартные характеристики: цвет любой по запросу. Один из вариантов: черная с красной полоской.

Заказать >>>

Сварные фитинги пнд

Сегментные фитинги пнд, применяются для сборки труб из полиэтилена и полипропилена. Сварное соединение имеет очень высок…

Подробнее >>>

Сварные фитинги пнд

Сегментные фитинги пнд, применяются для сборки труб из полиэтилена и полипропилена. Сварное соединение имеет очень высокую надежность и герметичность. Сегментарные сварные фитинги от завода ТрубоПласт отличаются тем, что толщина стенки будет соответствовать этому параметру трубы. Таким образом, sdr трубы будет совпадать с sdr фитинга. Другие типы фитингов не обеспечивают данное преимущество. Сварные фитинги пнд — единственный способ соединить трубопровод, если при его производстве использован нестандартный диаметр трубы. Возможны другие виды фитингов и муфт по запросу.

Заказать >>>

Производим трубы по диаметру:

Филигранно четкий диаметр полиэтиленовых труб

Толщина стенки трубы стабильна на протяжении всей длины

Гладкая поверхность трубы (без трещин, пузырей и раковин)

Превосходим ваши лучшие ожидания по качеству!

Высококачественное первичное сырье!
Каждая партия под контролем аттестованной лаборатории!
Строгий многоступенчатый контроль от сырья до продукта!
Четкое соответствие государственным стандартам!

Экструзионные линии Krauss Maffei Berstorff (Германия)

Производственная мощность 25 000 тонн в год

Система «Quick Switch»

Силосное хранение сырья

Пневмоподача к каждой линии подготовленного сырья

Специальная система «TruboPlastPacking» по упаковке и погрузке

Оборудование и мощности завода

Завод ТрубоПласт производит трубы пнд больших и малых диаметров с 2006г. Также в производственной программе другие виды пэ изделий: трубы PERT (для теплого пола), трубы полипропиленовые, фитинги сегментарные сварные. Формат производства полиэтиленовых труб: бухты и отрезки.
Завод ТрубоПласт, расположен в г.Туле. Продукцию нашего производства можно приобрести из складских наличий «Актитрейд» в городах: Тула, Москва, Курск, Орел, Белгород, Воронеж, Сочи! Также работаем под заказ на передельных схемах. Завод ТрубоПласт является не только известным производителем качественных полиэтиленовых труб, но также оказывает услуги аттестованной Испытательной лаборатории (центра). Еще одно направление – цех переработки вторичного сырья.
Будем рады видеть Вас в числе наших постоянных партнеров!

Сорокин Андрей Сергеевич

Получите прайс-лист нашей продукции

Для определения количества материалов и планирования расходов

ПОЛУЧИТЬ ПРАЙС-ЛИСТ

Дополнительные услуги завода трубопласт

Услуги Лаборатории

В состав аккредитованной лаборатории TruboPlastLaboratory, входит специализированный отдел ОТК ТрубоПласт. Лаборатория осуществляет свою деятельность с 2009г. Аккредитация испытательной лаборатории на право проведения сертификационных испытаний (аттестат аккредитации №RA.RU.21ТБ25).

Услуги Цеха переработки вторичного сырья

Специализированный цех ТрубоПласт по переработки вторичного сырья оснащенный импортным оборудованием ведущих производителей оказывает услуги по переработке вторичного сырья: полный комплекс от дробления до грануляции.

Сертификаты на продукцию

Галерея продукции

Технология соединения труб ПНД. Как соединить трубу ПНД с полипропиленом

Полимерные материалы давно и прочно вошли в жизнь человека. Из них можно встретить множество «заменителей» уже привычных вещей. Например, трубы: водопровод, канализация, газ и т.д. Неважно. Главное, что найти изделия из металла становится намного сложнее, тем более, что полимеры обладают универсальностью и имеют гораздо больше преимуществ.

Что такое трубы ПНД?

Трубы из полиэтилена низкого давления с аббревиатурой ПНД.У них очень хорошая производительность, например:

низкая теплопроводность
устойчивость к химическим реакциям, к внешним погодным условиям,
удобство монтажа
легкость,
.

Могут применяться как для водоснабжения, так и для канализации, газоснабжения и электрификации.

Монтаж трубы ПНД

Монтаж изделий может производиться как в промышленных масштабах, со сложным оборудованием и наличием нескольких специалистов, так и в домашних условиях, с малым диаметром, с определенными усилиями и минимальными знаниями.

В большинстве случаев установка проходит успешно, так как материал достаточно гибкий и хорошо поддается работе.

Способы подключения

Есть несколько вариантов как замкнуть трубы ПНД, некоторые можно выполнить своими руками без сварки, в некоторых нужно не только специальное приспособление, но и вызов специалиста.

Внутриблочное соединение – процесс монтажа, при котором не используются температурные воздействия и сварка.
Соединительное соединение — Монтаж с использованием сварки и высоких температур для плавления полиэтилена.

Съемный относится:

Соединение труб с компрессионными фитингами. Это специальные небольшие конструкции, которые шутят о двух краях изделия, при этом не требуют специального оборудования или знаний. Компрессионные фитинги лучше всего подходят для небольших диаметров – до 315мм.

С помощью фитингов любое соединение можно сделать «подвижным», то есть при необходимости заменить какую-то деталь будет проще. Тогда не потребуется дополнительного оборудования, кроме специального ключа для затяжки гаек, а также не потребуется профессиональных знаний и опыта.

Однако в этом случае есть маленькое «но». Такое соединение лучше использовать для несвободных труб. Потому что при очень высоком давлении может произойти стык.

Фланец

Этот тип подходит как для изделий из полиэтилена, так и для смешанного соединения, например, ПНД и Металл. Соединение происходит болтовым соединением со свободным фланцем.

При этом с одного конца трубы идет специальная втулка, на которую с другого конца надевается фланец.Этот способ считается разъемным, без сварки, хотя эта процедура имеет место быть, так как к трубе приваривается и втулка, и фланец.

Само подключение можно выполнить своими руками, используя только ключ для фиксации.

Постоянный

В данном случае, конечно, не обошлось без сварки. Но в отличие от предыдущих способов, этот хоть и сложнее, но все же надежнее и долговечнее, и не зависит от давления и напора в трубах. Также можно выделить 2 основных способа бытовых соединений.

ЭлектромоФТА

Это стыковка изделия со специальной муфтой со встроенной спиралью. Когда материал попадает в электроблок, он начинает нагреваться до температуры плавления полиэтилена. В результате получается герметичный шов. В принципе, это можно сделать и своими руками, но для большей уверенности лучше пригласить мастеров. Получить продукт из электромафии можно только после полного остывания полимера.

Сварочный домкрат

Предполагает наличие специального сварочного аппарата, в него помещаются оба края изделия, после чего под действием высоких температур полиэтилен расплавляется и соединяется. А затем также формируется герметичный шов, который обрабатывается после полного остывания.

Что выбрать?

Применимы все методы, в зависимости от ситуации и сложности работы. Если предпринимать такие действия, как, например, соединение труб очень большого диаметра (свыше 400мм), то вообще без нескольких человек и дополнительной специализированной техники не обойтись. Поэтому, если есть желание выполнить работу своими руками, следует сначала оценить ситуацию и свои силы, после чего можно приступать к выполнению работы.

Также не стоит забывать о безопасности, ведь любые ремонтно-строительные работы требуют ответственного подхода.

Полимеры прочно вошли в нашу жизнь. Из этого сырья получаются самые разнообразные изделия и конструкции. В современных канализационных и водопроводных системах (и в других трубопроводах) используют трубы ПНД. Такие изделия обладают той же прочностью, что и металлические аналоги, но при этом значительно легче в монтаже и намного дольше служат.Создать трубопроводы из полимерных труб можно без специального оборудования или оборудования. О том, как подключить фитинг ПНД, будет рассказано в этой статье.

Способы подключения

Чтобы сделать канализацию или сантехнику, трубы должны быть соединены, а место стыка может быть разборным или разборным. Второй способ подразумевает сварку. Для этого используют специальные приспособления.

Сборно-разборный компаунд имеет множество положительных качеств. Вот лишь основные из них:

Простота установки.Все работы можно сделать самостоятельно, даже без помощника.
Возможность демонтажа. Если трубы были забиты или повреждены, вы можете легко восстановить работу.

Именно поэтому почти все соединения труб ПНД (особенно в домах и квартирах) выполняются с использованием фитингов или муфт.

Для монтажа труб из полимеров могут применяться несколько видов фитингов. А именно:

Электрическая квартира. Это дизайн со специальным элементом.С помощью электричества проволока нагревается, что плавит пластик и создает прочную стыковку. С помощью такого фитинга создается точечное соединение.
Именно такая конструкция чаще всего используется при монтаже различных трубопроводов.
Сокращение. Этот фитинг предназначен для соединения труб различных димеров.

Электросварные фитинги применяются очень редко. Это определяется непонятностью получаемого соединения и дороговизной самого устройства.Редукционные фитинги используются при присоединении трубопроводов к счетчикам и другим элементам коммуникаций. Но чаще всего используются компрессионные конструкции.

Сами фитинги могут иметь различную геометрию. Используются как прямые соединения, так и под различными углами. Также широко распространены различные разветвители, тройники и другие конструкции. Кроме того, могут применяться как несъемные соединения, так и с возможностью смещения труб друг относительно друга.

Наиболее часто используемый компрессионный фитинг.Это обусловлено простотой его использования. Как соединить трубы ПНД при помощи компрессионного фитинга? Это будет потрачено сейчас. В первую очередь необходимо разобраться с устройством такой конструкции. Компрессионный фитинг состоит из:

корпуса полиэтиленовые;
уплотнительные кольца;
для защиты от механических повреждений используются зажимные кольца;
;
крышки-гайки.

Такие фитинги выпускаются разных диаметров. В магазинах можно найти исполнение для труб от 16 до Ø 110 мм.

Для соединения труб с помощью фитингов компрессора следуйте следующим инструкциям:

Конструкция фитинга в разобранном виде. Накидки-гайки откручиваются и на них надеваются концы патрубков (с них нужно снять фаску при помощи хорошо отточенного ножа или подделки).
Отмечаем на концах трубы расстояние, на которое они должны входить в трубу. Для облегчения компаундирования можно смочить фитинг и концы труб водой или слабым мыльным раствором.
Вставить трубы в фитинг на отмеченную длину. Потребуются физические усилия. Так труба войдет в уплотнительное кольцо.
Затем затяните накидную гайку. Желательно обойтись без применения инструмента только рукой. Это снижает риск перетаскивания гайки и, следовательно, ухудшения герметичности. На этом процесс завершен.

При использовании электросварочной арматуры необходим источник электроэнергии (генератор или электродвигатель). Трубы и сам соединительный элемент очищаются от загрязнений и закрепляются на одной оси. При этом необходимо добиться неподвижности всей конструкции.

Затем к арматуре подключается источник тока. В результате нагревательный элемент начинает плавить пластик. В расплавленном состоянии материал создает необходимое давление, и трубы прочно соединяются.

Современное строительство не обходится без использования полиэтиленовых труб.Трубы из полиэтилена низкого давления применяются в напорных и безнапорных трубопроводах. Для производства таких труб используется полиэтилен марок ПЭ100 и ПЭ 8.

Благодаря эластичности полиэтилена и простоте работы с этим материалом монтаж трубопровода производится с меньшими трудозатратами и быстрее.

Преимуществами использования труб ПНД являются их характеристики:

срок службы достигает 50 лет;
устойчивость к воздействию агрессивных сред;
возможность бестраншейной прокладки трубопровода, что экономически выгодно;
не подвержены коррозии;
гладкая поверхность трубы обеспечивает беспрепятственное прохождение жидкостей , в результате чего внутри труб не образуются различные приросты, а пропускная способность сохраняется на весь период;
и простота обработки позволяют быстро монтировать трубопроводы самой сложной конфигурации;
пНД обладают повышенной стойкостью к температурным перепадам;
благодаря высокой пластичности и механической прочности материала трубы ПНД могут применяться в районах с повышенной сейсмичностью, по мере движения грунта

Соединение труб ПНД в зависимости от назначения трубопровода производится двумя способами:

разъемное соединение, когда в процессе эксплуатации трубопровод может подвергаться демонтажу;
, подразумевает эксплуатацию трубопровода без последующей разборки.

Разъемные соединения выполнены с использованием фланцев из стали. В этом случае такое соединение будет называться фланцевым.

Местные соединения осуществляют специальными сварочными аппаратами при сварке труб друг с другом, с помощью суперлатной муфты на стыке труб, к которой присоединяют электронагревательные элементы.

В дополнение к этим методам существует еще одно цанговое соединение, в котором используются компрессионные фитинги.Этот метод меняется на трубопроводах малого диаметра.

Свариваются не только трубы друг с другом, но и любые детали, используемые для создания трубопроводов разной формы и конфигурации:

тройники равные и некомплектуемые;
метчиков;
крестов;
челноки для фланцев;
переходов.

Как соединить трубы ПНД максимально качественно, зависит от квалификации сварщика, выбранного способа соединения, условий, в которых производятся.

Сварка труб онлайн

Сварка труб производится на специальном сварочном оборудовании высококвалифицированными сварщиками. Для сварки полиэтиленовых труб применяют:

агрегаты механические сварочные,
электрогидравлические сварочные аппараты.

Механические предназначены только для устройства для сварки соединений полиэтиленовых труб, которые не будут подвергаться высокому давлению — канализационные, трубопроводы в жилищном строительстве, промышленные трубопроводы для жидких сточных вод.

Машины электрогидравлические сварочные применяются для соединения труб, предназначенных для прохождения жидкостей и газов высокого давления, а также для трубопроводов, испытывающих значительные механические нагрузки.

В том, что полиэтиленовые трубы хорошо свариваются, заключается их преимущество перед другими видами труб. В результате эти трубы нашли широкое применение при устройстве трубопроводов различного назначения.

Сварочный шов должен быть один и непрерывный. Это условие придает прочность соединению, эквивалентную прочности всей трубы или дополнительных частей, соединенных с трубой. Сварка полиэтиленовых труб этим способом является максимально выгодной как с точки зрения экономии денежных средств (не требует применения дополнительных стыковочных деталей), так и с точки зрения создания абсолютной прочности соединения. Прочность сварного шва облегчает в дальнейшем.

Соединение фитингов труб ПНД

Для устройства соединений труб малого диаметра (менее 50 мм) используются компрессионные фитинги и цанговое обжимное соединение. Обычно эти способы применяют, когда нет возможности приварить сварные трубы или использовать фланцевые соединения.Это могут быть стесненные условия или отсутствие сварочного оборудования и другие причины.

Существует несколько разновидностей арматуры, отличающихся способом установки.

Электросварочная арматура имеет в своей конструкции специальный элемент, который под действием электрического напряжения плавится Полиэтилен В результате образуется прочное соединение. Этот способ соединения полиэтиленовых труб идеально подходит для тех, у кого нет опыта сварочных работ, а трубопровод можно взять самых разных видов.

Компрессионные фитинги

еще лучше подходят для непрофессионалов. С таким способом соединения полиэтиленовых труб справится любой мужчина, если решит сделать ремонт в своей квартире самостоятельно.

Этот тип фитингов хорошо использовать, если вам нужно соединить трубопровод из полиэтилена в квартире и общую стальную трубу.

Особенностью компрессионных фитингов является то, что с их помощью соединяется трубка Металл ПНД, либо трубы из других материалов.

Фитинги редукционные предназначены для соединения полиэтиленовых труб различного диаметра, для присоединения трубы к счетчику воды, газа и другим приборам.

Кроме фитингов используются цанговые обжимные соединения, выдерживающие давление в трубопроводе до 25 атмосфер. Суть этого соединения в том, что в пластиковой втулке есть зубья, которые врезаются в трубу, а герметичность соединения обеспечивает резиновое уплотнительное кольцо.

Фланцевое соединение Труба PND

Фланцы часто используют фланцы для соединительного устройства.Имеются втулки для фланцев, которые привариваются к концам полиэтиленовых труб и фланцам из осажденной стали.

Используется фланцевое соединение:

при присоединении трубопровода из полиэтилена к стальным трубам, насосам, различной арматуре;
для быстрого демонтажа при авариях, ремонте или очистке;
для соединения труб большого диаметра.

При устройстве соединений полиэтиленовых и металлических труб используют свободные фланцы из стали, размер которых соответствует размеру металлических труб. В этом случае необходимо удалить все сеятели или другие острые выступы, которые могут повредить полиэтиленовую трубку.

При строительстве трубопроводов применяют трубы ПВХ из поливинилхлорида. Но по своим качествам они уступают трубам ПНД.

Даже соединение труб ПВХ и ПНД отличается. Если трубы из полиэтилена можно сваривать различными способами сварки, то трубы из ПВХ соединяют плавким предохранителем. Те трубы должны быть нагреты до определенной температуры.После, кольцо, которое находится внутри трубы, должно расплавиться, чтобы соединение заполнилось его массой. Это говорит о том, что трубы ПВХ можно использовать только в трубопроводах низкого давления.

(Аббревиатура означает, что изготавливаются из полиэтилена низкого давления). Как правило, для них используют марки ПЭ 80 и 100.

Основным преимуществом этих водоводов является гибкость материала и минимальная трудоемкость монтажа объектов трубопровода. С установкой такой конструкции справится любой человек, не обладающий специальными навыками.

Также токопроводящие элементы из ПНД выгодны тем, что не подвержены коррозии, могут укладываться без специальных траншей, устойчивы к подвижкам грунта, имеют небольшой вес, стойки к агрессивному воздействию различных сред. Срок службы такого гидрорельса — более 50 лет . За счет своих гладких стенок конструкция ПНД сохраняет работоспособность весь срок службы, так как скользкий полиэтилен не способствует увеличению водонепроницаемости посторонних веществ.

Соединение отдельных секций токопроводящего гидромуста может происходить двумя разными способами — разъемным и неразъемным . Как соединить трубы ПНД без сварки — фитинги? Выбор метода обусловлен назначением данной структуры.

Неразъемное соединение Чаще всего используется, если жидкость будет подаваться под давлением. Крепление фрагментов домкратного трубопровода осуществляется механической или электрогидравлической сваркой.

Соединение водопроводных труб Создается на случай установки систем самоточки. Например, это может быть домашняя канализация, куда вода точно не пойдет под напором. Также сборно-разборные способы собирают устройствами из элементов малых сечений, от 50 мм и ниже и токопроводящих магистралей, где заведомо предполагается изменение конфигурации в процессе эксплуатации трубопровода.

Разборная комбинация труб ПНД может быть фланец, муфта, цанговый обжим, то есть с помощью фитингов .Этот способ считается наиболее технологичным и менее трудоемким.

Фитингом в сантехнике называют соединительную часть трубопроводной системы, которая устанавливается в местах стыковки воздуховодов, участков разветвления устройства, поворотов, стыков фрагментов различного диаметра.

Также соединительные детали монтируются в местах предполагаемой разборки токопроводящей магистрали В целях ремонта, подключения дополнительных элементов или изменения комплектации.

Разновидности элементов

Арматура для сборки отдельных элементов в единую токопроводящую сеть бывает нескольких видов. Изготавливаются, как правило, из полиэтилена, но бывают и из латуни. По назначению можно разделить на несколько категорий:

Соединение труб ПНД одного диаметра компрессионными фитингами
Сборка трубопроводов из токопроводящих секций разного сечения
Создание ответвления в соответствии с общей схемой трубопровода
Трубы стыковочные ПНД с различными видами армирования
Выполнение поворота магистрали
Установка заглушки

Чаще всего эти соединительные элементы применяют при создании сборно-разборных конструкций Но есть тип, применяемый при создании сплошного трубопровода — фитинг электросварной или сварной.

По своим конструктивным особенностям и применению узлы стыковки можно разделить на несколько типов:

Муфты Для соединения труб ПНД. Они, в свою очередь, бывают трех основных категорий: зачетные, для участков одной секции, фланцевые, для толстых водопроводов, и компенсационные, для соединения магистралей большого диаметра.
Метчики . Данная конструкция используется для формирования поворотов трубопровода.
Переходники. Служат для крепления различной арматуры или участка из другого материала: чугуна, металлика.
Тройники и крестовины . Служат для создания ответвлений проводящей сети.
Заглушка . Используется для перекрытия жидкости или газа, поступающих в систему.

Каждый тип этого устройства предназначен для отдельного типа трубопроводной системы.

Какие преимущества по сравнению с другими видами имеет, читайте в специальном обзоре.

Полезная информация О. технические характеристики труб полипропиленовых для воды.

Об особенностях применения полиэтиленовых труб и фитингов в сантехнической сфере узнайте из с.

Способы крепления

Способы сборки соединительной конструкции делятся на три основных вида:

Электросварка Фитинги являются альтернативой сварке домкратов, которая используется при создании неразборных узлов. Эта запчасть представляет собой полиэтиленовую обжимную муфту, внутри которой находится электронагревательная спираль. Соединение ПНД — элементов посредством электромуфтовой сварки под силу даже начинающему ремонтнику.

Края совмещенных фрагментов вставить в раструб и соединить сварочный аппарат с узлом.За счет штрих-кода – маркировки с указанием нужной температуры, давления и продолжительности сварки, которая есть у каждой детали, все характеристики будут подобраны автоматически.

Крепление получается очень прочным, поэтому такой способ формовки чаще всего применяется в самых ответственных узлах.

Сварные — литые металлические муфты или тройники, сборка которых производится за счет сварки. Также часто делают так называемый «встык», где роль соединительной части, по сути, играют мелкие фрагменты трубы, сваренные с основным гидродомкратом.

Сжатие — Самый удобный вариант для создания разборной сети. Такие соединительные детали очень популярны за счет своей дешевизны и простоты монтажа.

Фитинг компрессионный состоит из ПЭТ-оболочек, уплотнений, расположенных в месте соединения, прижимных колец, выполняющих защитную функцию, прижимных втулок и гаек, закрывающих сочленение.

Материал, из которого изготовлен компрессионный фитинг, может быть другим.Диаметр варьируется от 16 до 110 мм .

Сборка компрессионного стыковочного узла производится в несколько несложных этапов:

Сначала нужно подготовить обе соединяемые детали. Для этого необходимо измерить, на какую глубину конец каждого из них войдет в суставную впадину. В этом месте на трубу наносится метка.
Затем необходимо смазать поверхность этого участка мыльным раствором, для улучшения скольжения.Тогда носить фитинг будет намного проще.
Отвинтить стопорную гайку соединительной конструкции.
Вставьте трубу в уплотнительное кольцо фитинга до метки.
Затяните верхнюю гайку.

При правильной установке шарнир будет герметичным и долговечным.

Как соединить трубы ПНД с фитингами — Пример соединения вы можете посмотреть на этом видео:

Другие методы

В основном при монтаже разъемных трубопроводных конструкций используются обжимные соединительные элементы .При массе достоинств, таких как простота монтажа, невысокая цена и разнообразие размеров, недостатков практически нет.

Но есть еще несколько растворов для создания сборно-разборных стыковочных узлов, Который время от времени используется при постройке токопроводящих гидроконструкторов:

Полиэтиленовые трубы низкого давления подходят для самых разных вариантов монтажа. Протягивание их через соединительные детали решает задачу и позволяет создать систему с меньшими трудозатратами .Сборка конструкции без сварки производится гораздо быстрее.

Компрессионные, или опрессовочные гасители очень популярны при создании трубопроводных конструкций и максимально просты в монтаже. Однако в наиболее ответственных местах рекомендуется использовать соединительные элементы, смонтированные с помощью электромуфтовой сварки.

Правильный выбор фитингов в соответствии с особенностями каждой системы гарантирует качество стыковочных узлов и длительный срок службы трубопровода.

Виртуальная психиатрическая помощь при перинатальной депрессии (Виртуальная ПНД): пилотное рандомизированное контролируемое исследование

https://doi.org/10.1016/j.jadr.2021.100085Get rights and content видео-визиты психиатра на дому при перинатальной депрессии.

•

Положительный опыт среди пользователей, в том числе комфорт при общении и удобство.

•

Уменьшение депрессивных симптомов в протоколе видео-посещений аналогично состоянию только при личном визите.

Abstract

Цели

Барьеры при оказании личной психологической помощи часто встречаются у беременных и родильниц с депрессией. Мы оценили осуществимость пробного протокола для оценки использования безопасной, синхронной виртуальной психиатрической помощи на дому.

Методы

В этом пилотном рандомизированном контролируемом исследовании, проведенном в Торонто, Канада, женщины в возрасте ≥18 лет, беременные или в возрасте 0–12 месяцев после родов, с баллами по Эдинбургской шкале послеродовой депрессии (EPDS) >12, были рандомизированы 1:1 в человек только посещает, или к условиям вмешательства, когда им предлагалась возможность видео-посещений для части или всего их последующего лечения.Мы оценили выполнимость протокола испытания и, во вторую очередь, оценку EPDS через 12 недель после рандомизации.

Результаты

63 женщины были рандомизированы (33 экспериментальные, 30 контрольные), из которых 87,9% ( n = 29) в экспериментальной группе и 66,7% ( n = 20) в контрольной группе завершили 12-недельное наблюдение анкета. Около 48,5% ( 90 503 n 90 504 = 16) участников группы вмешательства хотя бы один раз использовали видеовизиты с высокой приемлемостью для участников и поставщиков в ряде областей и без побочных эффектов.Средние баллы по шкале EPDS снизились с 16,6 (СО 5,06) до 11,6 (СО 4,77) и с 16,9 (СО 3,15) до 12,4 (СО 3,96) для экспериментальной и контрольной групп соответственно (скорректированная средняя разница -0,64, 95% ДИ от -2,95 до 1,67). .

Заключение

Было возможно набрать для протокола оценки видеопосещений психиатра по поводу перинатальной депрессии. Видеовизиты были приемлемы для пользователей и психиатров, оказывающих им медицинскую помощь. Будущее исследование не меньшей эффективности может оценить модераторов результатов лечения, чтобы изучить вариабельность эффективности в зависимости от тяжести заболевания и других факторов, а также экономическую эффективность различных типов стратегий видеовизитов для психиатрической помощи в этой группе населения.

Ключевые слова

Беременность

Послеродовой период

Депрессия

Виртуальный уход

Рекомендованные статьиЦитирование статей (0)

Ссылки на статьи

Послеродовой психоз — NHS

Послеродовой психоз — это серьезное психическое заболевание, которое может возникнуть вскоре после рождения ребенка. Заболевание поражает примерно 1 из 500 матерей после родов.

Многие рожавшие люди испытывают легкие изменения настроения после рождения ребенка, известные как «бэби-блюз». Это нормально и обычно длится всего несколько дней.

А вот послеродовой психоз сильно отличается от «бэби-блюза». Это серьезное психическое заболевание, требующее неотложной медицинской помощи.

Иногда его называют послеродовым психозом или послеродовым психозом.

Симптомы послеродового психоза

Симптомы обычно появляются внезапно в течение первых 2 недель после родов — часто в течение нескольких часов или дней после родов. Реже они могут развиться через несколько недель после рождения ребенка.

Симптомы могут включать:

галлюцинации — слух, зрение, обоняние или осязание вещей, которых нет
бред — мысли или убеждения, которые вряд ли верны
маниакальное настроение – слишком много или слишком быстро говорят и думают , чувство «под кайфом» или «на вершине мира»
плохое настроение – признаки депрессии, замкнутость или плаксивость, недостаток энергии, потеря аппетита, тревога, возбуждение или проблемы со сном
иногда смесь как маниакальное настроение, так и плохое настроение — или быстро меняющееся настроение
потеря запретов
чувство подозрительности или страха
беспокойство
чувство сильной растерянности
нехарактерное поведение

Когда обращаться за медицинской помощью

Послеродовой психоз — серьезное психическое заболевание, требующее неотложной медицинской помощи.Ситуация может быстро ухудшиться, и болезнь может поставить под угрозу безопасность матери и ребенка.

Немедленно обратитесь к врачу общей практики, если вы подозреваете, что у вас или у кого-то из ваших знакомых развились симптомы послеродового психоза. Вы должны запросить срочную оценку в тот же день.

Вы можете позвонить по номеру 111, если не можете поговорить с врачом общей практики или не знаете, что делать дальше. Ваша акушерка или патронажная сестра также могут помочь вам получить доступ к медицинскому обслуживанию.

Позвоните в свою кризисную группу, если у вас уже есть план ухода, потому что вы были оценены как подверженные высокому риску развития послеродового психоза.

Обратитесь в отделение неотложной помощи или позвоните по номеру 999, если вы считаете, что вам или кому-то из ваших знакомых может угрожать неминуемая опасность.

Имейте в виду, что если у вас послеродовой психоз, вы можете не осознавать, что больны. Ваш партнер, семья или друзья могут заметить признаки и принять меры.

Лечение послеродового психоза

Лечение обычно проводится в стационаре. В идеале это должно быть с вашим ребенком в специализированном психиатрическом отделении, называемом отделением матери и ребенка (MBU).Но вас могут поместить в общее психиатрическое отделение до тех пор, пока не появится MBU.

Лекарство

Вам могут быть назначены 1 или более из следующих препаратов:

антипсихотические препараты — для лечения маниакальных и психотических симптомов, таких как бред или галлюцинации
стабилизаторы настроения (например, литий) — для стабилизации настроения и предотвратить рецидив симптомов
антидепрессанты — для облегчения симптомов, если у вас есть серьезные симптомы депрессии, и могут использоваться вместе со стабилизатором настроения

Электросудорожная терапия (ЭСТ)

Электросудорожная терапия (ЭСТ) иногда рекомендуется, если все другие варианты лечения неэффективны не удалось, или когда ситуация считается опасной для жизни.

Большинство людей с послеродовым психозом полностью выздоравливают, если получают правильное лечение.

Психологическая терапия

По мере вашего выздоровления вам могут быть полезны посещения терапевта по когнитивно-поведенческой терапии (КПТ). КПТ — это разговорная терапия, которая может помочь вам справиться со своими проблемами, изменив то, как вы думаете и ведете себя.

Другие формы поддержки

Во время выздоровления может быть трудно смириться с послеродовым психозом.

Может оказаться полезным общение со сверстниками и другими людьми, перенесшими болезнь. В некоторых стационарных отделениях и сообществах есть работники поддержки сверстников, которые перенесли болезнь, и вы также можете получить поддержку через благотворительные организации.

Причины

Мы не уверены, что вызывает послеродовой психоз, но вы подвергаетесь большему риску, если у вас:

уже есть диагноз биполярного расстройства или шизофрении
у вас есть семейная история психических заболеваний, особенно послеродового психоза (даже если у вас нет психических заболеваний в анамнезе)
послеродовой психоз развился после предыдущей беременности

Снижение риска послеродового психоза

и наблюдаться у перинатального психиатра.

Примерно на 32 недель беременности вам необходимо провести совещание по планированию перед родами со всеми, кто принимает участие в уходе за вами. К ним относятся ваш партнер, семья или друзья, специалисты в области психического здоровья, ваша акушерка, акушер, патронажная сестра и врач общей практики.

Это делается для того, чтобы все знали о риске послеродового психоза. Вы все должны согласовать план ухода за вами во время беременности и после родов.

Вы получите письменную копию своего плана ухода, объясняющую, как вы и ваша семья можете быстро получить помощь, если вы заболеете, а также стратегии, которые вы можете использовать, чтобы снизить риск заболевания.

В первые несколько недель после рождения ребенка вас должны регулярно посещать на дому акушерка, патронажная сестра и медсестра по психическому здоровью.

Восстановление после послеродового психоза

Наиболее тяжелые симптомы, как правило, длятся от 2 до 12 недель, и полное выздоровление от этого состояния может занять от 6 до 12 месяцев или более. Но при лечении и правильной поддержке большинство людей с послеродовым психозом полностью выздоравливают.

За эпизодом послеродового психоза иногда следует период депрессии, тревоги и неуверенности в себе.Вам может понадобиться некоторое время, чтобы смириться с тем, что произошло.

Некоторые матери испытывают трудности в общении со своим ребенком после эпизода послеродового психоза или испытывают некоторую печаль из-за того, что упускают время с ребенком. При поддержке вашего партнера, семьи, друзей и вашей команды психического здоровья или в разговоре с другими людьми с жизненным опытом вы можете преодолеть эти чувства.

Многие люди, у которых был послеродовой психоз, продолжают рожать детей. Хотя существует вероятность 1 из 2, что у вас будет еще один эпизод после будущей беременности, вы должны быть в состоянии быстро получить помощь при правильном уходе, а риски можно снизить с помощью соответствующих вмешательств.

Помощь при послеродовом психозе

Послеродовой психоз может сильно повлиять на вашу жизнь, но поддержка доступна.

Возможно, вам будет полезно поговорить с другими людьми, у которых такое же заболевание, или обратиться в благотворительную организацию.

Вам могут быть полезны следующие ссылки:

Действия по борьбе с послеродовым психозом (APP)

Действия по борьбе с послеродовым психозом (APP) с помощью женщин, переживших послеродовой психоз, выпустили серию руководств.

Эти руководства охватывают такие темы, как:

восстановление после послеродового психоза
поддержка партнеров
планирование беременности
воспитание детей после послеродового психоза
беременность для женщин с биполярным расстройством

может общаться с другими людьми, страдающими послеродовым психозом.

Другие полезные ссылки

Поддержка людей в их выздоровлении

Людям с послеродовым психозом потребуется поддержка, чтобы помочь им в их выздоровлении.

Вы можете помочь своему партнеру, родственнику или другу:

сохранять спокойствие и поддержку
находить время, чтобы слушать
помогать по дому и готовить
помогать в уходе за детьми и кормить их ночью
позволять им получать как можно больше как можно больше спать
помощь с покупками и домашними делами
поддержание дома как можно более спокойного и тихого
отсутствие слишком большого количества посетителей

поддержка партнеров, родственников и друзей

послеродовой психоз может вызывать беспокойство у партнеров, родственников и друзья тоже.

Если ваш партнер, родственник или друг переживает эпизод послеродового психоза или выздоравливает, не бойтесь обратиться за помощью самостоятельно.

Поговорите со специалистом в области психического здоровья или обратитесь в перечисленные благотворительные организации.

PND-1186 Ингибитор FAK избирательно способствует апоптозу опухолевых клеток в трехмерной среде

Cancer Biol Ther. Авторская рукопись; Доступен в PMC 2011 APR 16.

Опубликовано в окончательной редактированной форме AS:

PMCID: PMC2933317

NIHMSID: NIHMS205870

, ^1, ^*, ^1, ^*, ¹, ¹, ¹, ¹, ¹, ¹, ², ², ³, ³, ³, ^1, ^# и ^1, ^#

Isabelle Tanjoni

¹ Кафедра репродуктивной медицины и патологии, Калифорнийский университет в Сан-Диего, Онкологический центр Мура, Ла-Хойя, Калифорния 92093

Колин Уолш

¹ Кафедра репродуктивной медицины, Сан-Диего, Онкологический центр Мура, Ла-Хойя, Калифорния 92093

Шон Урю

¹ Кафедра репродуктивной медицины и патологии, Калифорнийский университет в Сан-Диего, Онкологический центр Мура, Ла-Хойя, Калифорния 92093 9 0003

Alok Tomar

¹ Кафедра репродуктивной медицины и патологии Калифорнийского университета в Сан-Диего, Онкологический центр Мурса, Ла-Хойя, Калифорния 92093

Ju-Ock Nam

¹ Кафедра репродуктивной медицины и патологии Калифорнийский Сан-Диего, Онкологический центр Moores, Ла-Хойя, Калифорния 92093

Ainhoa Mielgo

¹ Кафедра репродуктивной медицины и патологии, Калифорнийский университет в Сан-Диего, Онкологический центр Moores, Ла-Хойя, CA 92093

Ssang-Taek Lim

¹ Кафедра репродуктивной медицины и патологии Калифорнийского университета в Сан-Диего, Онкологический центр Moores, Ла-Хойя, Калифорния 92093

Congxin Liang

² Scripps Florida, 5 90 0 0 8, Jupiters Way, Jupiters Way Марсель Кениг

² Скриппс Флорида, 130 Скриппс Уэй, Юпитер, Флорида 33458

Нила Патель

³ Пониард Фармасьютикалз Инк. , Южный Сан-Франциско, CA 94080

CHENI KWOK

³ Poniard Pharmaceuticals Inc., Южный Сан-Франциско, CA 94080

Джеральд МакМахон

³ Poniard Pharmaceuticals Inc., Южный Сан-Франциско, CA 94080

Dwayne G. Stupack

¹ Кафедра репродуктивной медицины и патологии Калифорнийского университета в Сан-Диего, Онкологический центр Moores, La Jolla, CA 92093

David D. Schlaepfer

¹ Кафедра репродуктивной медицины и патологии California San Diego, Moores Cancer Center, La Jolla, CA 92093

¹ Кафедра репродуктивной медицины и патологии Калифорнийского университета в Сан-Диего, Moores Cancer Center, La Jolla, CA 92093

² Scripps Florida, 130 Scripps Way, Jupiter, Florida 33458

³ Poniard Pharmaceuticals Inc., South San Francisco, CA 94080

Адрес соответствует: Дэвиду Д. Шлепферу, доктору философии, Калифорнийский университет в Сан-Диего, Онкологический центр Мура, отделение репродуктивной медицины, 0803, 3855 Доктор медицинских наук, Ла-Хойя, Калифорния 92093 , Телефон: (858) 822-3444, ude.

dscu@refpealhcsd

^* оба автора внесли равный вклад в это исследование

^# соавторы-соавторы

Окончательная отредактированная версия этой статьи доступна на веб-сайте Cancer Biol TherSee другие статьи в PMC, которые ссылаются на опубликованную статью.

Abstract

Опухолевые клетки могут расти независимо от прикрепления. Это частично опосредовано сигналами выживания, которые обходят ограничения нормального роста, контролируемые интегриновыми рецепторами клеточной поверхности. Киназа фокальной адгезии (FAK) представляет собой цитоплазматическую протеинтирозинкиназу, которая связывается с интегринами и модулирует различные клеточные процессы, включая рост, выживание и миграцию. Поскольку повышенная экспрессия FAK и фосфорилирование тирозина связаны с прогрессированием опухоли, ингибиторы FAK тестируются на противоопухолевое действие.Здесь мы анализируем PND-1186, замещенный пиридин обратимый ингибитор активности FAK с 50% ингибирующей концентрацией (IC ₅₀) 1,5 нМ in vitro . PND-1186 имеет IC ₅₀ ~100 нМ в клетках карциномы молочной железы, как определено антифосфоспецифическим иммуноблоттингом на FAK Tyr-397. PND-1186 не изменяет фосфорилирование тирозина c-Src или p130Cas в прикрепленных клетках, но функционирует, ограничивая движение клеток. Принимая во внимание, что 1,0 мкМ PND-1186 (более чем в 5 раз выше IC ₅₀) оказывал ограниченное влияние на пролиферацию клеток в условиях отсутствия адгезии или при выращивании в виде сфероидов или колоний на мягком агаре, 0.1 мкМ PND-1186 блокировал фосфорилирование тирозина FAK и p130Cas, способствовал активации каспазы-3 и запускал клеточный апоптоз. PND-1186 ингибировал рост подкожной опухоли карциномы молочной железы 4T1, что коррелировало с повышенным апоптозом опухолевых клеток и активацией каспазы 3. Добавление PND-1186 в питьевую воду мышей хорошо переносилось и подавляло рост опухоли асцит-ассоциированной карциномы яичника, связанный с ингибированием фосфорилирования тирозина FAK. Наши результаты лечения низким уровнем PND-1186 подтверждают вывод о том, что активность FAK избирательно способствует выживанию опухолевых клеток в трехмерных средах.

Ключевые слова: FAK, выживание клеток, апоптоз, интегрин, рост опухоли и выживаемость ¹ ^, ² . Связывание интегрина с внеклеточным матриксом способствует активации FAK, связанной с регуляцией различных нижестоящих сигнальных путей, вовлеченных в изменения формы и подвижности клеток ^-3-.Во многих опухолях и трансформированных клеточных линиях экспрессия FAK и фосфорилирование тирозина повышены. Нокдаун FAK в опухолевых клетках или мышиных моделях опухолей, где экспрессия FAK инактивирована, показал, что FAK важен для прогрессирования опухоли карциномы молочной железы ⁷ ^– ¹¹ . Важно отметить, что исследования, в которых активность FAK ингибировалась посредством либо доминантно-негативного фрагмента белка FAK, либо сравнения опухолевых клеток, экспрессирующих неактивную киназу FAK, показали, что активность FAK необходима для метастазирования карциномы молочной железы ¹² ^, ¹³ . Поскольку FAK связан с множественными рецепторами клеточной поверхности и нижестоящими сигнальными путями, фармакологическое ингибирование активности FAK может влиять на множественные аспекты опухолевой прогрессии ^-14-.

АТФ-конкурентные низкомолекулярные ингибиторы FAK были разработаны Novartis (TAE-226) ¹⁵ и Pfizer (PF-228, PF-562,271) ¹⁶ ^, ¹⁷ . Кроме того, были идентифицированы соединения (такие как Y15), которые блокируют доступ к основному аутофосфорилированию тирозина-397 FAK и связыванию киназ семейства Src с FAK ¹⁸ .TAE-226, который также является высокоаффинным ингибитором передачи сигналов рецептора инсулиноподобного фактора роста ¹⁹ , может предотвращать рост опухолевых клеток in vitro и in vivo ¹⁵ ^, ^{19 7728 –} 21 . Y15 способствует апоптозу клеток, а также ингибирует рост опухоли, хотя и в концентрациях, которые в 10-100 раз превышают IC50 ₅₀ для ингибирования FAK ¹⁸ ^, ²² . Напротив, PF-573,228 и PF-562,271 являются высокоселективными в отношении FAK и родственной киназы Pyk2 ¹⁶ ^, ¹⁷ , однако эти соединения не блокируют пролиферацию клеток и не способствуют апоптозу опухолевых клеток in vitro при 10- кратные концентрации выше 50% ингибирующей концентрации (IC ₅₀) для FAK.Таким образом, активность FAK не является существенной для клеточной пролиферации ²³ . Однако PF-562,271 предотвращает рост ксенотрансплантатов подкожной опухоли человека, и это связано со снижением плотности микрососудов и усилением апоптоза опухоли ¹⁷ . PF-562,271 также блокирует разветвление эндотелиальных клеток в хориоаллантоисной мембране кур и ангиогенезе кольца аорты мышей ^{, 23,}, ^,, ^{, 24,}, однако остается неясным, связаны ли эти действия с механизмом(ами), связанными с PF-562,271-индуцированным апоптоз опухолевых клеток.

Здесь мы представляем характеристику нового высокоспецифичного низкомолекулярного ингибитора FAK. PND-1186 имеет IC ₅₀ 1,5 нМ для рекомбинантного FAK и ~ 0,1 мкМ в клетках карциномы молочной железы, как определено анти-фосфоспецифическим иммуноблоттингом на FAK Tyr-397. Удивительно, но концентрации PND-1186 до 1,0 мкМ не ингибировали p130Cas (130 кДа Crk-ассоциированный субстрат) или фосфорилирование тирозина c-Src в прикрепленных клетках и оказывали ограниченное влияние на рост клеток в двумерной культуре.Однако PND-1186 ингибировал подвижность клеток карциномы молочной железы дозозависимым образом.

Отличительной чертой рака является способность расти независимо от привязки. Мы показываем, что 0,1 мкМ PND-1186 достаточно для стимуляции апоптоза клеток карциномы молочной железы 4T1 и карциномы яичника ID8 при выращивании в условиях суспензии, сфероида или мягкого агара. Это было связано с ингибированием фосфорилирования тирозина как FAK, так и p130Cas, что подтверждает гипотезу о том, что путь выживания FAK-p130Cas способствует трехмерному (3D) росту клеток.PND-1186 ингибирует рост подкожной опухоли 4T1 и связан с апоптозом опухолевых клеток. Точно так же введение низких доз PND-1186 с питьевой водой ингибировало опухолевое бремя ID8, связанное с асцитом яичников, без потери веса или заболеваемости у мышей. Наши результаты подтверждают мнение о том, что PND-1186 может действовать как новый профилактический и/или профилактический противоопухолевый агент.

Результаты

Свойства PND-1186 и селективность ингибирования FAK

PND-1186 имеет структуру первичного кольца 2,4-диаминопиридина ().Используя рекомбинантный домен киназы FAK в качестве слитого белка глутатион-S-трансферазы (GST) в анализе киназы in vitro (дополнительная рис. 1), PND-1186 ингибировал активность FAK с IC ₅₀ 1,5 нМ. Селективность PND-1186 оценивали с использованием службы Millipore KinaseProfiler. В этом скрининге 0,1 мкМ PND-1186 показал специфичность в отношении ингибирования киназы FAK, а также Flt3 (FMS-подобная тирозинкиназа 3). При более высокой концентрации PND-1186 (1 мкМ) FAK и Flt3 имели незначительную активность, а другие киназы, включая ACK1 (активированная Cdc42-ассоциированная тирозинкиназа 1), Aurora-A, CDK2 (циклинзависимая киназа 2)/циклин A, инсулин рецептор (IR), Lck (лимфоцит-специфическая протеинтирозинкиназа) и TrkA (тропомиозин-родственная киназа A) ингибировались более чем на 50% (1). Экспрессия Flt3 обнаруживается в клетках гемопоэтического происхождения и не обнаруживается в клетках 4T1, MDA-MB-231 или ID8, используемых в настоящем документе.

Свойства PND-1186 и селективное ингибирование FAK

(A) PND-1186 состоит из каркаса на основе 2,4-диаминопиридина. Для представленной частичной структуры PND-1186 X представляет собой связь или (C ₁ –C ₃ )алкил, содержащий 0–1 гетероатом, выбранный из группы, состоящей из N, O, S(O) и S(O). ) ₂ , где (C ₁ –C ₃ )алкил замещен 0–1 гидрокси, галогеном, (C ₁ –C ₃ )алкокси, (C ₁ –C ₃ )алкиламино или (C ₁ –C ₃ ) ₂ диалкиламиногруппы.R ¹ и R ² представляют собой 5-12-членные моноциклические, бициклические или полициклические, ароматические или частично ароматические кольца. R ³ представляет собой трифторметил, галоген, нитро или цианогруппу; соль, таутомер, сольват, гидрат или пролекарство. Ингибирование активности рекомбинантной киназы FAK на основе ELISA IC ₅₀ составляло 1,5 нМ, а клеточное ингибирование определяли с помощью иммуноблоттинга против фосфотирозина Tyr-397 FAK. PND-1186 растворим в воде, проявляет благоприятную стабильность микросом, в высокой степени связывается с белками в плазме (97%), проявляет пропорциональность дозы в биодоступности и высокий уровень перорального приема (стр.о) не токсичен для мышей. (B) Относительное ингибирование различных киназ с добавлением 0,1 или 1,0 мкМ PND-1186, выполненное службой профилирования киназ Millipore. Значения представляют собой процент активности, ингибирование более 50% выделено серым цветом. При концентрации 0,1 мкМ PND-1186 показал высокую селективность в отношении ингибирования FAK и Flt3.

Ингибирование PND-1186 FAK отличается от эффектов ингибиторов Src PTK

FAK действует как сигнальная киназа и связанный с клеточной адгезией каркас в опухолевых клетках для координации позиционного рекрутирования и фосфорилирования различных белков, связанных с цитоскелетом, таких как p130Cas и паксиллин ¹ ^, ²⁵ . Повышенное аутофосфорилирование FAK по Y397 является маркером активации FAK. Интегрин-опосредованное фосфорилирование Y397 FAK может способствовать связыванию тирозинкиназы Src-семейства с FAK и может приводить к FAK-опосредованной активации c-Src ^-26- . Поскольку как FAK, так и c-Src могут фосфорилировать общие нижележащие мишени, такие как p130Cas ²⁷ , остается неясным, будут ли эффекты ингибирования FAK и/или c-Src давать дифференциальные результаты в отношении событий фосфорилирования нижестоящих мишеней.

В клетках карциномы молочной железы мыши 4T1 мы ранее показали, что FAK важен для стимуляции инвазивного и метастатического клеточного фенотипа ¹³ .Повышение концентрации PND-1186 (от 0,1 до 1,0 мкМ), добавленного к клеткам 4T1, ингибировало фосфорилирование FAK Tyr-397 (pY397) и приводило к повышенным уровням общего белка FAK в течение 1 часа (). Аналогичные результаты были получены при добавлении PND-1186 к клеткам карциномы молочной железы человека MD-MBA-231 и клеткам карциномы яичника мыши ID8 (данные не показаны). Клеточная IC ₅₀ для ингибирования FAK pY397 была определена как ~ 0,1 мкМ PND-1186 (). Ингибирование PND-1186 FAK было обратимым, так как эксперименты с вымыванием показали, что фосфорилирование FAK pY397 полностью восстанавливается в течение 60 минут (10).Удивительно, но добавление PND-1186 к 1 мкМ не влияло на активность c-Src, определяемую по реактивности фосфоспецифических антител к фосфорилированию Src Tyr-416 (pY416) или p130Cas Tyr-249 (pY249) в прикрепленных клетках 4T1 (). Напротив, когда дазатиниб (BMS-354825) добавляли к клеткам 4T1 (ингибируя киназы гомолога 1 вирусного онкогена мышиного лейкоза Абельсона, Abl и Src-семейства), как Src pY416, так и p130Cas pY249 снижались дозозависимым образом () . Примечательно, что дазатиниб не влиял на уровни FAK pY397 (), и аналогичные результаты были получены с использованием клеток MD-MBA-231 или другого ингибитора Src, такого как 4-амино-5-(4-метилфенил)-7-( т -бутил) пиразоло[3,4- d ]-пиримидин или общеизвестный как PP1 (данные не показаны). В совокупности эти результаты показывают, что PND-1186 сильно ингибирует фосфорилирование FAK обратимым образом и что фосфорилирование Src pY416 и p130Cas pY249 зависит от Src, но не от активности FAK в прикрепленных клетках 4T1.

Ингибирующее действие PND-1186 отличается от дазатиниба (ингибирование Src)

Влияние PND-1186 на фосфорилирование тирозина FAK, c-Src и p130Cas. Клетки 4T1 высевали при 70% слиянии на планшеты для тканевых культур, покрытые 10 мкг/мл фибронектина. Клетки обрабатывали носителем (ДМСО) или увеличивающим (A) PND-1186 или (B) дазатинибом (LC Labs Inc.) добавление в течение 1 ч. Показаны общие уровни FAK, p130Cas, Src или актина в клеточных лизатах. Параллельно проводили фосфоспецифический иммуноблоттинг для определения изменений активности FAK или Src (pY397 FAK или pY416 Src) и фосфорилирования тирозина p130Cas (pY249 p130Cas). (C) Динамика фосфорилирования FAK pY397 в клетках 4T1 после 1-часовой обработки (PND-1186, 1 мкМ) с последующей промывкой PBS. Белковые лизаты готовили в указанные моменты времени после промывания PBS.

PND-1186 ингибирует подвижность 4T1 карциномы молочной железы

in vitro

Экспрессия FAK повышена при инвазивном раке человека ¹⁴ и передача сигналов FAK способствует направленному движению клеток ² ^{, 9 90Чтобы оценить, будет ли PND-1186 ингибировать миграцию клеток 4T1, были проведены замедленные анализы заживления ран в присутствии ДМСО (диметилсульфоксид, контроль) или 1 мкМ PND-1186 (и дополнительные видео 1 и 2) в течение 22 часов. PND-1186 предотвращал движение клеток 4T1, и это было связано с отсутствием образования выпячиваний и нечастым отделением краевых клеток 4T1 от коллективного монослоя. Никаких признаков отслоения или гибели клеток 4T1 не наблюдалось с 1 мкМ PND-1186 в течение 22 часов, и, что примечательно, визуализировались клетки, подвергающиеся клеточному делению в присутствии 1.0 мкМ PND-1186 (дополнительное видео-2). Количественное определение нескольких областей раны в течение 22 часов показало, что клетки 4T1, обработанные ДМСО, показали закрытие раны на 89%, тогда как клетки, обработанные PND-1186, закрылись только на 40% (10).}

PND-1186 ограничивает подвижность карциномы молочной железы 4T1

Сливающийся монослой клеток 4T1 ранили и фотографировали в течение 22 часов с помощью покадровой микроскопии в присутствии носителя (ДМСО) или 1 мкМ PND-1186. (A) Показаны репрезентативные изображения из анализа ран в 0, 11 и 22 ч, масштабная линейка составляет 250 мкм.(B) Количественная оценка покадровых изображений из одного репрезентативного эксперимента в трех экземплярах. Процент закрытия раны определяли с помощью изображения J, и результаты представляли собой среднее значение +/- стандартное отклонение. (C) Клетки предварительно обрабатывали (1 час) носителем или указанными концентрациями PND-1186, затем высевали на покрытые фибронектином трансвеллы MilliCell и позволяли мигрировать в течение 4 часов в присутствии лекарственного средства. В качестве химиоаттрактанта использовали 10% FBS. Результаты представляют собой процент контроля ДМСО (+/- стандартное отклонение, стандартное отклонение), выполненного в трех экземплярах (*p < 0. 05 по сравнению с контролем ДМСО с использованием ANOVA). PND-1186 не влиял на связывание клеток с фибронектином.

Для проверки результатов анализа ран, анализы подвижности камеры Millicell были выполнены с мембранами, покрытыми фибронектином и сывороткой, добавленной в качестве стимула хемотаксиса (). Добавление PND-1186 к анализу подвижности Millicell предотвращало движение клеток 4T1 дозозависимым образом с максимальным ингибированием ~ 60% при добавлении 0,4 мкМ PND-1186 в течение 4 часов. Важно отметить, что PND-1186 не влиял на адгезию клеток 4T1 к фибронектину, в отличие от добавления дазатиниба на субмикромолярных уровнях (данные не представлены).Эти результаты подтверждают важность активности FAK в стимулировании подвижности клеток 4T1.

Наномолярные уровни PND-1186 способствуют апоптозу 4T1 в суспендированных, но не адгезивных условиях не блокировать рост фибробластов или клеток карциномы предстательной железы при концентрации 1 мкМ или в 10 раз выше IC

₅₀ для FAK ¹⁶ .

Таким образом, активность FAK не может быть тесно связана с регуляцией клеточной пролиферации во всех клетках.Чтобы определить влияние на клетки 4T1, увеличивающиеся концентрации (от 0,1 до 1,0 мкМ) PND-1186 добавляли к прикрепленным или суспендированным клеткам 4T1, и подсчитывали общее количество клеток через 24, 48 и 72 часа (1). В прикрепившихся клетках через 24 и 48 часов различий не наблюдалось. Однако через 72 часа число клеток, обработанных 1,0 мкМ PND-1186, уменьшилось, а окрашивание йодидом пропидия (PI) и анализы проточной цитометрии выявили небольшое накопление в фазах S и G2/M клеточного цикла по сравнению с контролем ДМСО. .В суспендированных клетках 4T1 все концентрации PND-1186 уменьшали количество клеток через 48 часов, и эта разница была значимой (p<0,001) для 0,1 мкМ PND-1186 через 72 часа по сравнению с ДМСО (1). Интересно, что анализ окрашивания PI клеток, обработанных 1,0 мкМ PND-1186, не выявил различий в клеточном цикле. Однако при окрашивании PI наблюдалось накопление субдиплоидных (1N) клеток, что является маркером апоптоза в других типах клеток ²⁸ .

Эти результаты показывают, что PND-1186 оказывает ограниченное влияние на прогрессирование клеточного цикла, а влияние на общее количество клеток может быть связано с повышенной гибелью клеток.

Селективный апоптоз клеток 4T1 в суспензии при низких уровнях PND-1186

(A) Клетки 4T1 высевали в условиях адгезии (планшет, обработанный тканевой культурой) и в условиях отсутствия адгезии (планшет, покрытый поли-HEMA). Клетки обрабатывали ДМСО или указанными концентрациями PND-1186, собирали через 24, 48 и 72 ч и подсчитывали. Значения представляют собой средние значения (+/-SD), полученные в трех повторностях (*p<0,05; ***p<0,0001 с использованием ANOVA). (B) Анализ клеточного цикла, определенный окрашиванием йодидом пропидия (PI) и проточной цитометрией клеток 4T1, обработанных PND-1186 в течение 72 часов.Указано относительное содержание ДНК. Адгезивные клетки, обработанные 1 мкМ PND-1186, демонстрируют небольшое увеличение в клетках фазы S и G2/M. Никаких существенных различий не наблюдалось с взвешенными клетками. Анализы являются репрезентативными для двух независимых экспериментов. (C) PND-1186 способствует расщеплению каспазы-3 только в суспензии. Лизаты из прилипших или суспендированных клеток 4T1, обработанных в течение 24 ч ДМСО или указанным количеством PND-1186, анализировали методом иммуноблотинга с антителами к pY397 FAK, тотальному FAK, расщепленной каспазе 3 и GAPDH.(D) Проточная цитометрия использовалась для определения процента аннексина V-положительного окрашивания прилипших или суспендированных клеток 4T1, обработанных в течение 24 часов ДМСО или указанным количеством PND-1186. Средние значения +/- стандартное отклонение определяли с помощью трехкратного анализа (*p<0,05; ***p<0,0001 с использованием ANOVA).

Чтобы определить, вызывает ли PND-1186 апоптоз приостановленных клеток 4T1, лизаты прикрепленных и приостановленных клеток 4T1 обрабатывали PND-1186 в течение 24 часов и анализировали с помощью иммуноблоттинга (). ПНД-1186 на 0.1 мкМ в равной степени ингибировал фосфорилирование FAK pY397 в прикрепленных и суспендированных клетках. Примечательно, что обнаружение расщепленной каспазы 3 было повышено в суспендированных клетках, обработанных PND-1186 (максимум при 0,4 мкМ), но не было обнаружено в прилипших клетках, обработанных PND-1186 (). Расщепление каспазы 3 связано с активацией каспазы 3 и является инициатором клеточного апоптоза ²⁹ . В качестве независимой проверки апоптоза клеток 4T1 в суспензии при добавлении PND-1186 клетки обрабатывали в течение 24 часов и анализировали на связывание аннексина V, как определяли с помощью проточной цитометрии ().В условиях адгезии были обнаружены только низкие уровни аннексин V-позитивных клеток, и они не увеличивались при добавлении PND-1186 до 1,0 мкМ. Напротив, суспендированные контрольные клетки 4T1 демонстрировали повышенное окрашивание аннексина V, и оно было дополнительно увеличено до 50–60% положительного окрашивания аннексина V при добавлении от 0,1 до 0,4 мкМ PND-1186 (). В совокупности запуск апоптоза клеток 4T1 в суспендированных условиях при добавлении низкого уровня PND-1186 предполагает, что активность FAK может быть существенной для выживания клеток в условиях, не зависящих от прикрепления. Напротив, устойчивость адгезивных клеток 4T1 к высоким уровням PND-1186 подтверждает представление о том, что активность FAK не является существенной для выживания клеток, ассоциированных с адгезией.

PND-1186 ингибирование фосфорилирования FAK и p130Cas тирозина в условиях роста сфероидов

Было высказано предположение, что выращивание опухолевых клеток в виде трехмерных (3D) многоклеточных сфероидов in vitro имитирует аспекты солидных опухолей по сравнению с клетками, выращенными в двумерные монослои ³⁰ .Поскольку PND-1186 избирательно способствует апоптозу клеток 4T1 в условиях взвешенных клеток (), клетки 4T1 культивировали в виде 3D-сфероидов, и добавляли увеличивающиеся концентрации PND-1186 (от 0,1 до 1,0 мкМ) в течение 72 часов, чтобы определить влияние на размер сфероида (). При 0,1 мкМ PND-1186 наблюдалось примерно 3-кратное уменьшение среднего размера сфероидов, а максимальные эффекты наблюдались при 0,2 мкМ PND-1186. Важно отметить, что эти низкие концентрации PND-1186 близки к IC ₅₀ для ингибирования FAK pY397 в прикрепленных клетках 4T1 ().

PND-1186 ингибирует рост сфероидов 4Т1 и фосфорилирование FAK-p130Cas в суспензии на 72 ч. Шкала бара составляет 100 мкм. (B) Размер сфероида через 72 часа (n = 40) был определен путем расчета площади с использованием изображения J из фазово-контрастных изображений. Показаны средние значения (+/- SD) (***p<0,0001 с использованием ANOVA). (C) Как сфероиды, PND-1186 способствует дефосфорилированию FAK и p130Cas.Адгезивные (Ad) необработанные 4T1, суспендированные контрольные (ДМСО, 0) или обработанные PND-1186 клеточные лизаты 4T1 анализировали иммуноблоттингом с антителами к pY397 FAK, FAK, pY249 p130Cas, pY410 p310Cas, p130Cas, pY416 Src, Src и актину.
Соответственно, для определения влияния PND-1186 на фосфорилирование тирозина FAK и p130Cas в сфероидах 4T1 использовали иммуноблоттинг (). Интересно, что общий уровень фосфорилирования FAK pY397 был снижен в условиях 3D-сфероида по сравнению с условиями прикрепления 4T1.Не было обнаружено различий в фосфорилировании p130Cas pY249 или p130Cas pY410 в прилипших по сравнению с контрольными 3D-сфероидами 4T1 (дорожки 1 и 2). Однако 0,1 мкМ PND-1186 сильно ингибировало фосфорилирование FAK pY397, p130Cas pY249 и p130Cas pY410 в сфероидах 4T1 (дорожка 3). Увеличивающееся добавление PND-1186 приводило к повышенным общим уровням FAK, без изменений в экспрессии p130Cas и устойчивому ингибированию фосфорилирования FAK и p130Cas по тирозину (4). Никаких изменений в уровнях экспрессии ни Src pY416, ни Src в прикрепленных, сфероидных или обработанных PND-1186 сфероидных клетках 4T1 ().Важно отметить, что ингибирование фосфорилирования p130Cas с помощью PND-1186 в сфероидах 4T1 отличается от отсутствия эффектов, когда клетки 4T1 выращивают в виде двумерного (2D) монослоя (2). Поскольку взаимодействие FAK с p130Cas, как было показано, способствует выживанию клеток ^{, 25,}, ^,, ^{, 31,}, а ингибирующее действие PND-1186 на расположенные ниже по течению мишени FAK выборочно выявляются, когда клетки культивируют в условиях, не зависящих от прикрепления или в трехмерных условиях, наши результаты подтверждают гипотезу о том, что фосфорилирование FAK мишеней, таких как p130Cas, способствует выживанию клеток 4T1 в условиях 3D.
PND-1186 уменьшает количество и размер колоний на мягком агаре при наномолярных концентрациях
Можно утверждать, что 3D-сфероиды, независимые от привязки, не полностью воспроизводят архитектуру зарождающихся растущих опухолей молочной железы, которые имеют некоторый тип временного каркаса. Таким образом, клетки 4T1 выращивали в виде колоний на мягком агаре и оценивали эффекты добавления PND-1186 (). К 10 дню добавление PND-1186 ингибировало как общее количество, так и размер колоний на мягком агаре 4T1 дозозависимым образом (1).Аналогичные результаты были получены, когда PND-1186 был добавлен через 4 дня после появления клеток 4T1 в мягком агаре (дополнительная рис. 2). Максимальное ингибирующее действие на размер колоний было получено при использовании 0,2 мкМ PND-1186 (1), и это соответствовало усилению апоптоза клеток 4T1 (>50%), что определялось вздутием мембраны и усадкой клеток колоний в мягком агаре (1). В совокупности наши результаты подтверждают гипотезу о том, что PND-1186 не действует как общее цитотоксическое лекарство, а избирательно и сильно мешает выживанию клеток в трехмерной среде.
Ингибирование PND-1186 количества и размера колоний 4T1 в мягком агаре связано с повышенным апоптозом
Клетки 4T1 заключали в 0,3% агар. Добавляли носитель (ДМСО) или указанные концентрации PND-1186 и через 10 дней визуализировали колонии с помощью фазово-контрастной микроскопии (n=10 изображений на условие). (A) Показаны репрезентативные изображения колоний 4T1, масштабная линейка составляет 1 мм. (B) Среднее количество колоний на поле и (C) средний размер колонии через 10 дней были рассчитаны с использованием изображения J.Площади колоний определяли, по меньшей мере, по 200 колоний на условие. (D) Репрезентативные фазово-контрастные изображения морфологии колонии мягкого агара 4T1 через 48 часов. Шкала бара составляет 100 мкм. (E) Апоптоз количественно определяли путем визуального осмотра не менее 200 клеток и определяли как появление пузырей мембраны или сморщивание клеток. Наблюдали десять полей для каждого условия, а столбцы представляют собой средние значения (+/- стандартное отклонение) из одного эксперимента, проведенного в трех повторностях. Значительную разницу между группами и контролем ДМСО определяли с помощью ANOVA (* p<0.05; ** р<0,001; *** р<0,0001).
PND-1186 ингибирует рост подкожной опухоли 4T1 путем индукции апоптоза
Для определения чувствительности роста опухоли 4T1 к введению PND-1186 флуоресцентно меченные mCherry клетки 4T1 выращивали подкожно у мышей BALB/c (). Через восемь дней для формирования первичной опухоли каждые 12 ч (два раза в день, два раза в день) в течение 5 дней вводили носитель или PND-1186 в дозе 30 мг/кг или 100 мг/кг в течение 5 дней, после чего опухоли mCherry 4T1 визуализировались в situ с последующей экстракцией и взвешиванием ().В то время как опухоли 4T1, обработанные носителем, были ярко флуоресцентными, как правило, многодольчатыми и становились инвазивными по отношению к окружающим тканям, опухоли у мышей, получавших 100 мг/кг PND-1186, содержали темные нефлуоресцентные центры, обычно были округлыми и слабо спаянными. к подкожным тканям (). Обработка 100 мг/кг PND-1186 значительно снижала конечную массу опухоли 4T1 в 2 раза (n=8, p<0,05), тогда как 30 мг/кг PND-1186 немного уменьшала конечную массу опухоли, но существенно не отличалась от контроля (n= 8, р>0. 05). Чтобы определить, была ли потеря флуоресценции mCherry в центре опухолей 100 мг/кг PND-1186 связана с повышенным клеточным апоптозом, медиальные срезы анализировали с помощью окрашивания TUNEL () и анти-расщепляемой каспазы 3 (). Введение как 30, так и 100 мг/кг PND-1186 значительно увеличивало окрашивание TUNEL опухоли по сравнению с контролем, получавшим носитель (1). Поскольку повышенное окрашивание расщепленной каспазы-3 было также обнаружено в опухолях мышей, получавших PND-1186 (), эти результаты совпадают с нашими анализами in vitro и показывают, что PND-1186 способствует апоптозу клеток 4T1 в 3D-условиях, что приводит к ингибированию опухолевого роста in vivo .
PND-1186 ингибирует рост подкожной опухоли 4T1 путем индукции апоптоза
Один миллион mCherry-меченых клеток 4T1 вводили подкожно мышам BALB/c. Через 8 дней мыши получали носитель, 30 мг/кг PND-1186 или 100 мг/кг PND-1186 два раза в день (дважды в день). Опухоли собирали после 5 дней лечения. (A) Репрезентативные флуоресцентные изображения OV-100 опухолей 4T1, меченных mCherry, in situ. Невротические ядра видны в опухолях, обработанных 100 мг/кг PND-1186. Масштабная линейка равна 1 см.(B) Влияние PND-1186 на конечный вес опухоли. Значения являются средними (+/- SD). (C) Количественная оценка средней интенсивности флуоресцентного окрашивания TUNEL (+/- SD) в медиальных срезах опухоли (n = 10 на группу), как определено с использованием изображения J. Для панелей A и C были выявлены значительные различия между группами, получавшими носитель и PND-1186. определено с помощью ANOVA (* p < 0,05; ** p < 0,001). (D) Репрезентативные изображения срезов опухоли, окрашенных TUNEL (весь срез опухоли выделен красным). Масштабная линейка 0,2 мм. (E) Оценка ассоциированного с клетками (окрашивание ДНК Hoechst, синий) и окрашивания расщепленной каспазы-3 в контрольных или обработанных PND-1186 опухолях.Масштабная линейка 0,1 мм.
PND-1186 ингибирует рост опухоли карциномы яичника
in vivo
Во время прогрессирования опухолевых клеток карциномы яичника клетки могут диссоциировать от первичной опухоли и расти в виде многоклеточных сфероидов в перитонеальном пространстве ³² . Поскольку PND-1186 избирательно способствует апоптозу карциномы молочной железы 4T1 в трехмерных средах, влияние PND-1186 на рост клеток карциномы яичника мыши ID8 оценивали in vitro и in vivo ().Наблюдалось дозозависимое снижение количества клеток ID8 при выращивании в суспендированной клеточной культуре с 0,1 мкМ PND-1186, демонстрирующее значительное ингибирование через 72 часа () и способствующее резкому снижению количества жизнеспособных клеток через 15 дней (). Чтобы определить, могут ли низкие уровни PND-1186 влиять на рост ID8 in vivo, клетки вводили внутрибрюшинно мышам C57BL6, а через 11 дней мышам давали 0,5 мг/мл PND-1186 в 5% сахарозе вместо питьевой воды. на основе ad libitum .При добавлении ПНД-1186 и сахарозы в питьевую воду побочных эффектов и потери массы тела не отмечено. После 30 дней лечения PND-1186 значительно уменьшил количество клеток, связанных с асцитом, по сравнению с контрольной группой сахарозы (), и это было связано с почти полным ингибированием FAK pY397 при введении 0,5 мг/мл PND-1186 (). В совокупности наши результаты показывают, что PND-1186 ингибирует рост клеток карциномы молочной железы и яичников in vitro и in vivo .Избирательное воздействие PND-1186 на стимуляцию апоптоза клеток в трехмерной среде указывает на новую роль активности FAK в генерации независимых от привязки сигналов выживания.
PND-1186 ингибирует рост опухоли карциномы яичника
(A и B) Клетки ID8 высевали в неадгезивных условиях (планшет с покрытием из поли-HEMA) в присутствии ДМСО или указанных количеств PND-1186 и перечисляли из от 24 до 168 ч, как указано. (B) Жизнеспособные клетки определяли методом исключения трипанового синего с использованием анализатора Vi-Cell через 15 дней.(C) PND-1186 снижает количество опухолевых клеток при асците. Десять миллионов клеток ID8 вводили мышам C57BL6 (внутрибрюшинно) и через 11 дней мыши получали ad libitum PND-1186 (0,5 мг/мл) в растворе, содержащем 5% сахарозы. Контрольные мыши получали 0,5% сахарозы в питьевой воде. Асцит собирали через 30 дней и определяли объем клеточного осадка после центрифугирования. (A–C) Значения (n = 8 на группу) представляют собой средние значения (+/-SD), полученные в трех повторностях, и значимость была определена с помощью ANOVA (* p < 0.05; ***p<0,0001 по сравнению с контролем). (D) Оценка фосфорилирования FAK в ассоциированных с асцитом клетках, определяемая с помощью анти-FAK с последующим фосфоспецифическим иммуноблоттингом против FAK pY397. (E) Отношение фосфорилированного FAK pY397 к общему уровню FAK в асцитных клетках, как определено денситометрией с использованием изображения J (n = 8 на группу). На диаграммах «коробка с усами» показано распределение данных: квадратное, среднее; нижняя строка, 25 ^-й-й процентиль; средняя линия, медиана; верхняя строка, 75 ^-й-й процентиль; и усы, 5 ^й или 95 ^й процентилей.
Обсуждение
Повышенная экспрессия и фосфорилирование FAK связаны с прогрессированием опухоли и малигнизацией ¹⁴ . По этой причине, а также из-за известных свойств FAK стимулировать клеточную миграцию, существует значительный интерес к разработке ингибиторов для клинического применения ⁶ . Ингибиторы FAK, такие как TAE-226, обладают относительно широкой специфичностью, что усложняет интерпретацию механизма действия ¹⁹ . Однако PF-562,271 обладает высокой специфичностью в отношении FAK и родственной киназы Pyk2 и может предотвращать рост ксенотрансплантата человека у мышей с ослабленным иммунитетом ¹⁷ .Это может происходить за счет повышенного апоптоза сосудистых клеток в опухолях ¹⁷ или за счет подавления стромального ангиогенеза ²³ ^, ²⁴ .
Здесь мы представляем характеристику нового обратимого низкомолекулярного ингибитора FAK на основе 2,4-диаминопиридина. PND-1186 имеет IC ₅₀ 1,5 нМ для рекомбинантного FAK и проявляет высокую специфичность к FAK in vitro при 0,1 мкМ, как определено анализами Millipore KinaseProfiler (). В двумерной монослойной культуре клеток 0.1 мкМ PND-1186 сильно ингибирует фосфорилирование FAK Y-397, не влияя на фосфорилирование p130Cas или c-Src тирозина (4). Напротив, ингибитор Abl/Src дезатиниб блокирует события фосфорилирования тирозина p130Cas и Src, не влияя на FAK. Как и ожидалось, PND-1186 предотвращает подвижность клеток дозозависимым образом (), а замедленная микроскопия показала, что клетки рака молочной железы 4T1 продолжали подвергаться клеточному делению в присутствии 1,0 мкМ PND-1186 (см. Дополнительные видео 1 и 2). ).Однако 0,1 мкМ PND-1186 было достаточно для стимуляции апоптоза клеток карциномы молочной железы 4T1 и карциномы яичника ID8, когда клетки выращивали в условиях суспензии, сфероида или мягкого агара (– и ). Это было связано с ингибированием как FAK, так и p130Cas, но не фосфорилирования тирозина Src, что подтверждает гипотезу о том, что селективный путь выживания FAK-p130Cas способствует росту трехмерных опухолевых клеток.
В каждом из наших исследований ингибирование FAK подтверждалось блоттингом pY397 и оценкой участков субстрата FAK на p130Cas. Поскольку 0,1 мкМ PND-1186 обладает высокой специфичностью в отношении ингибирования FAK, наши данные позволяют предположить, что PND-1186 может действовать главным образом путем прямого ингибирования FAK опухолевых клеток. Важно отметить, что активность FAK блокировалась при сходных концентрациях среди клеток, выращенных в 2D-культуре. В отличие от клеток, культивируемых в 3D-среде, клетки 2D-культуры не продемонстрировали зависимости выживания от FAK (11). Культура на жестких двумерных поверхностях может снизить потребность в активности FAK для выживания. Однако для выживания необходима некоторая некиназная активность FAK, поскольку для пролиферации фибробластов с дефицитом FAK требуется коинактивация опухолевого супрессора p53 ³³ , а условный нокаут FAK способствует остановке роста опухолевых клеток и апоптозу ⁸ ^, ¹⁰ ^, ¹¹.Поскольку клетки ID8 обладают интактной передачей сигналов p53, а клетки 4T1 являются p53-нулевыми, однако обе клетки проявляют чувствительность к низкоуровневой обработке PND-1186 при апоптозе, наши результаты подтверждают представление о том, что ингибирование PND-1186 FAK влияет на p53-независимые пути в 3D. -культивируемые клетки.
В этом исследовании мы изучили фосфорилирование p130Cas в качестве нижестоящего репортера активности FAK. Хотя PND-1186 блокировал фосфорилирование p130Cas в 3D-условиях, на это фосфорилирование не влияло ингибирование FAK в стандартных 2D-условиях культивирования.Это указывает на то, что взаимодействие с жестким субстратом может либо стабилизировать фосфорилированный p130Cas, либо способствовать его фосфорилированию альтернативными тирозинкиназами, такими как Src, как ранее было показано для зависимой от силы передачи сигналов ^-34-. Хотя наши результаты в отношении специфического сигнального соединения FAK-p130Cas в 3D остаются коррелятивными, фосфорилирование p130Cas способствует устойчивости клеток к апоптозу в суспензии ³⁵ и выживанию опухолевых клеток в 3D ³⁶ ^, ³⁷ .Механически, фосфорилирование FAK Y397 также важно для облегчения внутренней активации интегрина ^-38-. Т.о., в 3D сфероидах активность FAK может способствовать взаимодействию интегрина с молекулами адгезии на соседних опухолевых клетках, тем самым способствуя передаче сигналов выживания клеток. Такая роль также согласуется с многочисленными связями между p130Cas и белками, влияющими на ремоделирование актина цитоскелета ^-27-. Ожидается, что эти взаимодействия будут подавлять сигналы про-смерти путем лигирования интегринов, приводя к активации Akt и подавлению каспазы 3 ³⁹ .
Наши анализы также расширили наблюдения in vitro 3D-специфического ингибирования FAK-p130Cas на ингибирование роста опухоли 4T1 и ID8, связанного с повышенным клеточным апоптозом ( и ). Интересно, что мы не наблюдали влияния на васкуляризацию опухоли в подкожных опухолях 4T1 (неопубликованные наблюдения). Можно утверждать, что агрессивного роста опухоли 4T1, которая секретирует множество воспалительных и ангиогенных факторов роста, может быть достаточно, чтобы преодолеть антиангиогенные эффекты ингибирования FAK.Однако ингибирующее действие PND-1186 на рост опухоли яичника ID8 in situ в виде перитонеального асцита, вероятно, также опосредовано независимым от ангиогенеза эффектом. Таким образом, хотя ингибирование FAK может влиять на ангиогенез, наши данные в совокупности указывают на то, что такая активность может быть несущественной для ингибирования роста опухоли in vivo . Скорее, ключевой оказалась индукция апоптоза среди клеток, растущих в трехмерной среде.
Наши результаты также повышают вероятность того, что активация FAK может обеспечить селективное преимущество опухолевым клеткам, растущим в трехмерном микроокружении.Поскольку рост гепатоцеллюлярной карциномы в 3D был связан с повышенным уровнем FAK ⁴⁰ , а повышенная экспрессия FAK связана с прогрессированием опухоли ⁴ ^– ⁶ , передача сигналов FAK может способствовать росту клеток в 3D среде, обычно наблюдаемой при злокачественных новообразованиях. Поскольку наши доклинические исследования показывают, что PND-1186 обладает низкой собственной токсичностью для мышей и эффективен при введении низких концентраций ad libitum в стимулировании апоптоза опухоли, есть значительные преимущества для тестирования PND-1186 в качестве противораковой терапии в клинике.
Материалы и методы
Химический синтез
PND-1186 был идентифицирован с помощью высокопроизводительного скрининга активности киназы и традиционных методов медицинской химии. Структура будет опубликована в другом месте (М. Кениг, рукопись готовится). PND-1186 синтезировали и получали в виде соли HCl, как описано в патентной заявке ⁴¹. Для анализов in vivo PND-1186 растворяли в воде (растворимость = 22 мг/мл).
Каталитический домен FAK бакуловируса и анализ киназы in vitro в виде слияния с GST и перемещен в вектор экспрессии бакуловируса pAcG2T (Pharmingen, Baculogold).Клоны вируса идентифицировали с помощью анализа бляшек и амплифицировали. Для экспрессии белка клетки SF9 трансдуцировали при множественности заражения 2–5 БОЕ/клетку и культивировали при 27°С в течение 48 ч. Аффинную хроматографию на глутатион-агарозе использовали для очистки GST-FAK (411–686) с последующим фракционированием по размеру с использованием хроматографии Hiload 16/60 Superdex (GE Healthcare).
Белок концентрировали и хранили в замороженном виде в 50 мМ Трис, рН 8,0, 150 мМ NaCl, 1 мМ ортованадата Na, 0,5 мМ ЭДТА, 0,5 мМ ЭГТА, 0,1% β-меркаптоэтанола и 20% глицерина.Чистота была оценена как >90% с помощью SDS-PAGE. Активность киназы GST-FAK in vitro измеряли и сравнивали с меченым His FAK 411–686 (Millipore) с использованием набора для скрининга K-LISA (Calbiochem) и сополимера поли(Glu:Tyr) (4:1) (P0275, Sigma) в качестве субстрата, иммобилизованного на титрационных микропланшетах. Значения IC ₅₀ определяли с различными концентрациями тестируемых соединений в буфере, содержащем 50 мкМ АТФ и 10 мМ MnCl ₂ , 50 мМ HEPES (рН 7,5), 25 мМ NaCl, 0,01% БСА и 0,1 мМ ортованадата натрия для 5 мин при комнатной температуре.Серийно разведенные соединения в концентрациях ½-Log (начиная с 1 мкМ) тестировали в трех экземплярах. Фосфорилирование субстрата измеряли с использованием антител против pTyr, конъюгированных с пероксидазой хрена (PY20, Santa Cruz Biotechnology) с количественным определением цвета по спектрометрии. Значения IC ₅₀ были определены с использованием модели Hill-Slope. Профилирование киназной селективности проводили с использованием сервиса KinaseProfiler (Millipore).
Реагенты и клетки
Антитела к β-актину (AC-17) были получены от Sigma-Aldrich.Антитела к Src (Src-2) были получены от Santa Cruz Biotechnology. Антитела к FAK (4,47) были от Millipore. Сайт- и фосфоспецифические антитела к pY249 p130Cas, pY410 p130Cas, pY416 Src и анти-расщепленной каспазе-3 были получены от Cell Signaling Technology. Анти-pY397 FAK и TOPRO-3 были получены от Invitrogen. Анти-GAPDH (глицеральдегид-3-фосфатдегидрогеназа) был получен от Chemicon, фибронектин бычьей плазмы был получен от Sigma, а дазатиниб и PP1 были получены от LC Laboratories и Calbiochem соответственно. Клетки карциномы молочной железы мыши 4T1 и клетки карциномы молочной железы человека MDA-MB-231 были взяты из Американской коллекции типовых культур.Клетки карциномы яичника мыши ID8 были получены от Katherine Roby ⁴² . Клетки культивировали в среде Игла, модифицированной Дульбекко, с добавлением 10% эмбриональной телячьей сыворотки (FBS), 1 мМ заменимых аминокислот, 2 мМ глутамина, 100 ЕД/мл пенициллина и 100 мкг/мл стрептомицина. Для исследований in vitro PND-1186 растворяли в диметилсульфоксиде (ДМСО) и хранили при -80°C до момента использования. Конечная экспериментальная концентрация ДМСО составляла от 0,1% до 0,2%. Кодирующую последовательность красного флуоресцентного белка mCherry (pmCherry-C1, Clontech) субклонировали в лентивирусный вектор экспрессии (pCDH-MSC1) и получали рекомбинантный лентивирус, как описано ¹³ .Трансдуцированные клетки 4T1 обогащали с помощью сортировки клеток с активацией флуоресценции (FACSAria, Becton-Dickinson) для получения стабильной популяции клеток mCherry-4T1.
Анализы роста клеток в зависимом от прикрепления, сфероидном и мягком агаре
Клетки (2×10 ⁵ ) высевали на 35-мм лунку в адгезивных (обработанных тканевой культурой) и неадгезивных условиях (поли-HEMA-покрытие) ) в 6-луночных планшетах (Costar) в питательной среде. Между 24 и 168 часами собирали все клетки, готовили суспензию отдельных клеток путем ограниченной обработки трипсином-ЭДТА и подсчитывали количество жизнеспособных клеток путем окрашивания и подсчета трипановым синим (ViCell XR, Beckman).Для определения площади сфероида клетки визуализировали через 72 ч в фазовом контрасте с использованием микроскопа Olympus IX51. Площадь рассчитывали с использованием программного обеспечения Image J (версия 1.43). Для анализа на мягком агаре 48-луночные планшеты покрывали смесью 1:4 2% агара (EM Science) в 0,2 мл питательной среды (нижний слой). Высевали 5×10 ⁴ клеток на лунку (в трех экземплярах) в смеси 0,3% агара в 0,2 мл питательной среды (верхний слой). После застывания агара добавляли 0,2 мл питательной среды, содержащей ДМСО или ПНД-1186 (конечная концентрация для 0.6 мл). В отдельных экспериментах ПНД-1186 добавляли через 4 дня. Через 10 дней колонии визуализировали в фазовом контрасте, подсчитывали 9 полей (3 поля на лунку) и определяли общую площадь с помощью изображения J. Для всех анализов экспериментальные точки выполнялись в трех экземплярах, и эксперименты повторялись не менее двух раз. .
Иммуноблоттинг
Белковые экстракты клеток готовили с использованием лизирующего буфера, содержащего 1 % Triton X-100, 1 % дезоксихолата натрия и 0,1 % SDS, и разделяли с помощью 4–12 % SDS-PAGE (электрофорез в полиакриламидном геле с додецилсульфатом натрия). и последовательный иммуноблоттинг, выполненный, как описано ¹³ .Относительные уровни экспрессии и реактивность фосфоспецифических антител измеряли с помощью денситометрического анализа блотов с использованием Image J.
Анализы миграции клеток
Стимулированный сывороткой хемотаксис с использованием Millicell (диаметр 12 мм с порами 8 мкм; Millipore) проводили, как описано ранее. ⁴³ . Обе стороны мембраны покрывали фибронектином (10 мкг/мл) и стимулировали хемотаксис добавлением 10% FBS в нижнюю камеру. Точки данных представляют количество клеток (9 полей) из трех миграционных камер, по крайней мере, из двух независимых экспериментов. Для анализа подвижности закрытия царапин клетки высевали на покрытые фибронектином (10 мкг/мл) 12-луночные планшеты со стеклянным дном (MatTek) и голодали по сыворотке (0,5% FBS) в течение 16 часов. Клетки наносили кончиком пипетки, промывали фосфатно-солевым буфером (PBS) и пополняли 10% средой FBS с ингибитором FAK или без него (1 мкМ). Покадровые серии были получены путем получения изображений с 10-минутными интервалами в течение до 22 часов при 37 ° C с влажностью и регулировкой CO ₂ с использованием объектива 10X на автоматизированном столике (Olympus IX81).Траектории клеток и пройденное расстояние измеряли, отслеживая положение ядер во времени с помощью Image J.
Анализы клеточного роста и апоптоза
Для анализа клеточного роста прикрепленные или взвешенные клетки обрабатывали PND-1186 в течение указанного времени, собирали как отдельные клеточную суспензию путем ограниченной обработки трипсином, фиксируют 70% этанолом, собирают центрифугированием и промывают PBS. Осадок клеток ресуспендировали в 300 мкл PBS, содержащего йодистый пропидий (PI) (10 мкг/мл), свободную от ДНКазы РНКазу (100 мкг/мл, Qiagen), а затем инкубировали при 37°C при перемешивании в течение 1 часа.Образцы анализировали с помощью проточной цитометрии (FACSCalibur, Becton-Dickinson), а анализы клеточного цикла выполняли с помощью программного обеспечения ModFit LT3.2 (компания Verity Software). Содержание гипоплоидной ДНК как меру клеточного апоптоза определяли окрашиванием PI, как описано ²⁸ . Для анализа клеточного апоптоза прилипшие или суспендированные клетки обрабатывали PND-1186 и собирали, как указано выше, окрашивали на связывание с фикоэритрином (PE)-конъюгированным аннексином V и реактивность 7-аминоактиномицина (7-AAD) (BD Pharmingen) и анализировали. в течение 1 часа с помощью проточной цитометрии.Ворота квадрантов были расположены на основе аутофлуоресценции клеток (отрицательные) обработанных стауроспорином (положительных) контролей. Апоптоз рассчитывали как процент аннексина V-позитивных клеток. В анализах на мягком агаре апоптоз определяли путем визуального осмотра не менее 200 клеток и определяли как появление вздутия мембраны или сморщивание клеток. Апоптоз также выявляли по появлению реактивности антител к расщепленной каспазе-3 в белковых лизатах с помощью иммуноблоттинга.
Обнаружение апоптоза в опухолях
Свежие опухоли были быстро заморожены в компаунде Optimal Cutting Temperature (OCT) (Tissue Tek), сделаны тонкие срезы (7 мкМ) с использованием криомикротома (Leica 3050S) и помещены на предметные стекла.Срезы фиксировали 3% параформальдегидом, пермеабилизировали в PBS, содержащем 0,1% Triton, в течение 3 мин и блокировали 8% козьей сывороткой в PBS в течение 60 мин при комнатной температуре. Для выявления активированной каспазы-3 срезы инкубировали с расщепленным антителом к каспазе-3 (1:200, разведенным в 2% козьей сыворотке в PBS) в течение 18 ч при 4°C, промывали PBS и инкубировали с флуоресцеинизотиоцианатом (FITC). конъюгированный антикроличий и TOPRO-3 (синий) для обнаружения ДНК. Срезы визуализировали на конфокальном микроскопе Nikon Eclipse C1 с фокусным расстоянием 1.Масляный объектив 4 NA 60X с отверстием 30 мкм и анализ с использованием программного обеспечения EZ-C1 3.50 (Nikon). Апоптоз опухоли также измеряли с помощью окрашивания концевой метки терминальной дезоксинуклеотидилтрансферазой dUTP (TUNEL) с использованием набора тетраметилродамина (TMR) в соответствии с инструкциями производителя (Roche). Светлопольные и флуоресцентные изображения целых срезов опухоли были получены с использованием стереомикроскопа Zeiss M2-Bio, оснащенного цифровой цветной камерой INFINITY1-3C и объективом 4X.
Исследования опухолей мышей
Самки мышей C57BL6 и BALB/c в возрасте от шести до восьми недель были получены из Harlan Laboratories (Индианаполис, Индиана) и помещены в свободные от патогенов условия в соответствии с рекомендациями Ассоциации по оценке и аккредитации для Уход за лабораторными животными, международный.Все исследования in vivo проводились в соответствии с утвержденным протоколом содержания и использования экспериментальных животных в учреждениях. Растущие опухолевые клетки собирали путем ограниченной трипсинизации, промывали в PBS и подсчитывали с использованием ViCell XR (Beckman) перед инъекцией. Жизнеспособность клеток, измеренная по исключению трипанового синего, составляла >95%. Для роста подкожной опухоли 1×10 ⁶ mCherry-меченых клеток 4T1 в 100 мкл PBS инъецировали в задний бок мышам Balb/C. Через 8 дней мышей с опухолями одинакового объема (измеряемых с помощью штангенциркуля и определяемых по длине × ширине ²/2) объединяли в группы (n=8 в группе) и растворяли PND-1186 в полиэтиленгликоле 400 (PEG400) в PBS. (1:1) вводили (100 мкл) подкожно в область шеи по 30 мг/кг или 100 мг/кг каждые 12 часов.Контрольным животным вводили инъекции PEG400:PBS, и через 13 дней опухоли визуализировали in situ с помощью системы прижизненной флуоресцентной молекулярной визуализации Olympus OV100, опухоли вырезали и взвешивали, половину замораживали в ОКТ, а половину растворяли в буфере для лизиса белка для фосфорилирования FAK. анализы. Для роста опухоли карциномы яичника ID8 мышам C57BL6 внутрибрюшинно вводили 0,8 мл 1×10 ⁷ клеток ID8 в PBS. Через 11 дней для питья давали 0,5 мг/мл PND-1186, растворенного в 5% сахарозе в воде, а контрольные мыши получали 5% сахарозу (n=8 на группу).Введение продолжали ad libitum в течение 30 дней, после чего мышей подвергали эвтаназии, собирали асцитическую жидкость, клетки получали центрифугированием (2000 об/мин в течение 5 мин), объем клеток измеряли с помощью пипетки, а затем солюбилизировали в буфере для лизиса белка для анализа иммуноблоттинга.
Статистический анализ
GraphPad Prism (v5.0a) использовался для определения значимых различий между группами с помощью однофакторного дисперсионного анализа (ANOVA) с последующим апостериорным тестом Тьюки. Различия между парами данных были установлены с использованием непарного двустороннего t-критерия Стьюдента или двустороннего критерия Манна-Уитни.
Благодарности
Мы благодарим Сьюзи Моррис за административную помощь. Мы благодарим Yuanjun He и Par Holmberg за усилия по проектированию и синтезу PND-1186. Алок Томар и Ссанг-Тэк Лим были поддержаны стипендиями Американской кардиологической ассоциации, 0825166F и 0725169Y соответственно. Дж. О. Нам был поддержан стипендией Корейского исследовательского фонда (KRF-2008-357-E00007). Эта работа была частично поддержана грантами NIH Д. Ступаку (CA107263) и Д. Шлепферу (CA102310) и грантом Армии США на медицинские исследования (OC080051) Д.Шлепфер. Д. Шлепфер является признанным исследователем AHA (0540115N).
Сокращения, используемые в
+ + + +
2D двумерная
3D трехмерная
ANOVA дисперсионный анализ
ставка два раза в день
ДМСО диметилсульфоксид
ФСП фокальной адгезии киназы
ФБС фетальной бычьей сыворотки
ФИТЦ флуоресцеинизотиоцианатом
GAPDH глицеральдегид-3-фосфат-дегидрогеназы
GST глутатион-S-трансферазы
IC ₅₀ 50% ингибирующей концентрации
MDM2 мыши двойной минуты 2
Октябрь оптимальное соединение температура резания
p130Cas 13 0 кДа Crk-ассоциированные субстрат
PBS фосфатно-солевой буфер
ПЭГ400 полиэтиленгликоль 400
PI пропидий йодид
SD стандартное отклонение
SDS -page натрия додецилсульфат полиакриламидного гель-электрофореза
TUNEL дезоксинуклеотидтрансферазу дУТФ ник конец маркировки
Сноски конфликты интересов Раскрытие
авторы: Neela Patel, Cheni Квок и Gerald McMahon связаны с Poniard Pharmaceuticals Inc. Отсутствие других конфликтов интересов.
Ссылки
1. Schlaepfer DD, Hauck CR, Sieg DJ. Передача сигналов через киназу фокальной адгезии. Прог Биофиз Мол Биол. 1999; 71: 435–478. [PubMed] [Google Scholar]2. Митра С.К., Хэнсон Д.А., Шлепфер Д.Д. Киназа фокальной адгезии: в управлении и контроле подвижности клеток. Nat Rev Mol Cell Biol. 2005; 6: 56–68. [PubMed] [Google Scholar]3. Томар А., Шлепфер Д.Д. Киназа фокальной адгезии: переключение между GAP и GEF в регуляции подвижности клеток. Curr Opin Cell Biol.2009 [бесплатная статья PMC] [PubMed] [Google Scholar]4. Маклин Г.В., Каррагер Н.О., Авизените Э., Эванс Дж., Брантон В.Г., Фрейм М.С. Роль киназы фокальной адгезии при раке — новая терапевтическая возможность. Нат Рев Рак. 2005; 5: 505–515. [PubMed] [Google Scholar]5. Чжао Дж., Гуань Дж. Л. Передача сигнала киназой фокальной адгезии при раке. Метастазы рака, ред. 2009; 28:35–49. [PubMed] [Google Scholar]6. Парсонс Дж.Т., Слэк-Дэвис Дж., Тилман Р., Робертс В.Г. Киназа фокальной адгезии: нацеливание на сигнальные пути адгезии для терапевтического вмешательства. Клин Рак Рез. 2008; 14: 627–632. [PubMed] [Google Scholar]7. Benlimame N, He Q, Jie S, Xiao D, Xu YJ, Loignon M, et al. Передача сигналов FAK имеет решающее значение для взаимодействия рецепторов ErbB-2/ErbB-3 для онкогенной трансформации и инвазии. Джей Селл Биол. 2005; 171: 505–516. [Бесплатная статья PMC] [PubMed] [Google Scholar]8. Луо М., Фан Х., Надь Т., Вэй Х., Ван С., Лю С. и др. Специфическое для эпителия молочной железы удаление киназы фокальной адгезии подавляет онкогенез молочной железы, воздействуя на стволовые/прогениторные клетки рака молочной железы.Рак Рез. 2009; 69: 466–474. [Бесплатная статья PMC] [PubMed] [Google Scholar]9. Провенцано П.П., Инман Д.Р., Элисейри К.В., Беггс Х.Е., Кили П.Дж. Специфическое для эпителия молочной железы нарушение киназы фокальной адгезии задерживает образование опухоли и метастазирование в модели рака молочной железы человека у трансгенных мышей. Ам Джей Патол. 2008; 173:1551–1565. [Бесплатная статья PMC] [PubMed] [Google Scholar]10. Lahlou H, Sanguin-Gandreau V, Zuo D, Cardiff RD, McLean GW, Frame MC и др. Специфическое для эпителия молочной железы нарушение киназы фокальной адгезии блокирует прогрессирование опухоли молочной железы.Proc Natl Acad Sci U S A. 2007;104:20302–20307. [Бесплатная статья PMC] [PubMed] [Google Scholar]11. Пылаева Ю., Гиллен К.М., Джеральд В., Беггс Х.Е., Райхардт Л.Ф., Джанкотти Ф.Г. Ras- и PI3K-зависимый онкогенез молочной железы у мышей и людей требует передачи сигналов киназы фокальной адгезии. Джей Клин Инвест. 2009; 119: 252–266. [Бесплатная статья PMC] [PubMed] [Google Scholar]12. van Nimwegen MJ, Verkoeijen S, van Buren L, Burg D, van de Water B. Потребность в киназе фокальной адгезии на ранней стадии образования метастазов аденокарциномы молочной железы в легкие.Рак Рез. 2005; 65: 4698–4706. [PubMed] [Google Scholar] 13. Митра С.К., Лим С.Т., Чи А., Шлепфер Д.Д. Внутренняя активность киназы фокальной адгезии контролирует метастазирование ортотопической карциномы молочной железы посредством регуляции экспрессии активатора урокиназы плазминогена в сингенной модели опухоли. Онкоген. 2006; 25:4429–4440. [PubMed] [Google Scholar] 14. Митра СК, Шлепфер ДД. Передача сигналов FAK-Src, регулируемая интегрином, в нормальных и раковых клетках. Curr Opin Cell Biol. 2006; 18: 516–523. [PubMed] [Google Scholar] 15. Ши К., Хьельмеланд А.Б., Кейр С.Т., Сонг Л., Викман С., Джексон Д. и др.Новый низкомолекулярный ингибитор киназы фокальной адгезии, TAE226, ингибирует рост глиомы. Мол Карциног. 2007; 46: 488–496. [PubMed] [Google Scholar] 16. Слэк-Дэвис Дж. К., Мартин К. Х., Тилман Р. В., Иваницкий М., Унг Э. Дж., Отри С. и другие. Клеточная характеристика нового ингибитора киназы фокальной адгезии. Дж. Биол. Хим. 2007; 282:14845–14852. [PubMed] [Google Scholar] 17. Roberts WG, Ung E, Whalen P, Cooper B, Hulford C, Autry C, et al. Противоопухолевая активность и фармакология селективного ингибитора киназы фокальной адгезии, PF-562,271.Рак Рез. 2008; 68: 1935–1944. [PubMed] [Google Scholar] 18. Голубовская В.М., Нюберг С., Чжэн М., Квех Ф., Магис А., Остров Д. и др. Низкомолекулярный ингибитор, тетрагидрохлорид 1,2,4,5-бензолтетраамина, нацеленный на сайт y397 киназы фокальной адгезии, снижает рост опухоли. J Med Chem. 2008; 51:7405–7416. [Бесплатная статья PMC] [PubMed] [Google Scholar]19. Лю Т.Дж., ЛаФортун Т., Хонда Т., Омори О., Хатакеяма С., Мейер Т. и др. Ингибирование как киназы фокальной адгезии, так и киназы рецептора инсулиноподобного фактора роста I подавляет пролиферацию глиомы in vitro и in vivo.Мол Рак Тер. 2007; 6: 1357–1367. [PubMed] [Google Scholar] 20. Гальдер Дж., Лин Ю.Г., Мерритт В.М., Спаннут В.А., Ник А.М., Хонда Т. и другие. Терапевтическая эффективность нового ингибитора киназы фокальной адгезии TAE226 при раке яичников. Рак Рез. 2007;67:10976–10983. [PubMed] [Google Scholar] 21. Голубовская В.М., Вирниг К., Канс В.Г. TAE226-индуцированный апоптоз в клетках рака молочной железы со сверхэкспрессией Src или EGFR. Мол Карциног. 2007; 47: 222–234. [PubMed] [Google Scholar] 22. Hochwald SN, Nyberg C, Zheng M, Zheng D, Wood C, Massoll NA, et al.Новый низкомолекулярный ингибитор FAK снижает рост рака поджелудочной железы человека. Клеточный цикл. 2009; 8: 2435–2443. [Бесплатная статья PMC] [PubMed] [Google Scholar]23. Лим С-Т, Миколон Д, Ступак ДГ, Шлепфер ДД. FERM-контроль функции FAK: значение для терапии рака. Клеточный цикл. 2008; 7: 2306–2314. [Бесплатная статья PMC] [PubMed] [Google Scholar]24. Weis SM, Lim ST, Lutu-Fuga KM, Barnes LA, Chen XL, Göthert JR, et al. Компенсаторная роль Pyk2 во время ангиогенеза у взрослых мышей, лишенных FAK эндотелиальных клеток.Джей Селл Биол. 2008; 181:43–50. [Бесплатная статья PMC] [PubMed] [Google Scholar]25. Zouq NK, Keeble JA, Lindsay J, Valentijn AJ, Zhang L, Mills D, et al. FAK задействует несколько путей для поддержания выживания фибробластов и эпителия: различные роли паксилина и p130Cas. Дж. Клеточные науки. 2009; 122: 357–367. [Бесплатная статья PMC] [PubMed] [Google Scholar]26. Ву Л., Бернард-Трифило Дж.А., Лим Ю., Лим С.Т., Митра С.К., Урю С. и др. Отдельные события активации FAK-Src способствуют стимулируемой интегринами альфа5бета1 и альфа4бета1 подвижности клеток нейробластомы.Онкоген. 2008; 27:1439–1448. [Бесплатная статья PMC] [PubMed] [Google Scholar]27. Дефилиппи П., Ди Стефано П., Кабоди С. p130Cas: универсальный каркас в сигнальных сетях. Тенденции клеточной биологии. 2006; 16: 257–263. [PubMed] [Google Scholar] 28. Nicoletti I, Migliorati G, Pagliacci MC, Grignani F, Riccardi C. Быстрый и простой метод измерения апоптоза тимоцитов с помощью окрашивания йодидом пропидия и проточной цитометрии. Дж Иммунол Методы. 1991; 139: 271–279. [PubMed] [Google Scholar] 29. Мазумдер С., Плешка Д., Алмасан А.Активация каспазы-3 является критической детерминантой апоптоза, вызванного генотоксическим стрессом. Методы Мол Биол. 2008; 414:13–21. [PubMed] [Google Scholar] 30. Фридрих Дж., Зайдель С., Эбнер Р., Кунц-Шугхарт Л.А. Скрининг на наркотики на основе сфероидов: соображения и практический подход. Нат Проток. 2009; 4: 309–324. [PubMed] [Google Scholar] 31. Алмейда Э.А., Илич Д., Хан К., Хаук Ч.Р., Джин Ф., Кавакацу Х. и др. Передача сигналов выживания матрикса: от фибронектина через киназу фокальной адгезии к c-Jun NH(2)-концевой киназы. Джей Селл Биол. 2000; 149: 741–754. [Бесплатная статья PMC] [PubMed] [Google Scholar]32. Шилд К., Экленд М.Л., Ахмед Н., Райс Г.Э. Многоклеточные сфероиды в метастазах рака яичников: биология и патология. Гинекол Онкол. 2009; 113:143–148. [PubMed] [Google Scholar] 33. Ilic D, Almeida EA, Schlaepfer DD, Dazin P, Aizawa S, Damsky CH. Сигналы выживания внеклеточного матрикса, передаваемые киназой фокальной адгезии, подавляют p53-опосредованный апоптоз. Джей Селл Биол. 1998; 143: 547–560. [Бесплатная статья PMC] [PubMed] [Google Scholar]34. Савада Ю., Тамада М., Дубин-Талер Б.Дж., Чернявская О., Сакаи Р., Танака С. и др.Определение силы путем механического удлинения субстрата киназ семейства Src p130Cas. Клетка. 2006; 127:1015–1026. [Бесплатная статья PMC] [PubMed] [Google Scholar]35. Чо С.Ю., Клемке Р.Л. Внеклеточно регулируемая активация киназы и связывание CAS/Crk регулируют миграцию клеток и подавляют апоптоз во время инвазии внеклеточного матрикса. Джей Селл Биол. 2000; 149: 223–236. [Бесплатная статья PMC] [PubMed] [Google Scholar]36. Кабоди С., Тиннирелло А., Ди Стефано П., Бизаро Б., Амброзино Э., Кастеллано И. и др. p130Cas как новый регулятор пролиферации эпителиальных клеток молочной железы, выживания и онкоген-зависимого онкогенеза молочной железы HER2-neu.Рак Рез. 2006; 66: 4672–4680. [PubMed] [Google Scholar] 38. Майкл К.Е., Дамбо Д.В., Бернс К.Л., Хэнкс С.К., Гарсия А.Дж. FAK модулирует усиление клеточной адгезии посредством активации интегрина. Мол Биол Селл. 2009 [Бесплатная статья PMC] [PubMed] [Google Scholar]40. У Ю.М., Тан Дж., Чжао П., Чен З.Н., Цзян Дж.Л. Морфологические изменения и молекулярная экспрессия клеток гепатоцеллюлярной карциномы в трехмерной культуральной модели. Опыт Мол Патол. 2009; 87: 133–140. [PubMed] [Google Scholar]41. Лян С, Кениг М, Хе Ю, Холмберг П.Ингибиторы киназы фокальной адгезии. Всемирная организация интеллектуальной собственности. 2008 WO2008115369. [Google Академия]42. Roby KF, Taylor CC, Sweetwood JP, Cheng Y, Pace JL, Tawfik O, et al. Разработка сингенной мышиной модели событий, связанных с раком яичников. Канцерогенез. 2000; 21: 585–591. [PubMed] [Google Scholar]43. Лим И., Лим С.Т., Томар А., Гардель М., Бернард-Трифило Дж.А., Чен С.Л. и др. Связи PyK2 и FAK с фактором обмена гуаниновых нуклеотидов p190Rho регулируют активность RhoA, образование фокальной адгезии и подвижность клеток.Джей Селл Биол. 2008; 180:187–203. [Бесплатная статья PMC] [PubMed] [Google Scholar]
Чем это отличается от «Baby Blues»
Рождение ребенка — это большая перемена в вашей жизни. Вы, вероятно, ожидаете, что будете счастливы и горды новым членом вашей семьи, но многие мамы вместо этого чувствуют себя подавленными и подавленными.
Некоторое время это нормально. После родов уровень гормонов падает, что влияет на ваше настроение. Ваш новорожденный, вероятно, тоже просыпается в любое время суток, поэтому вы не высыпаетесь.Уже одно это может вызвать у вас раздражение.
Возможно, вы просто беспокоитесь о своем ребенке, и это вызывает стресс, с которым вы раньше не сталкивались.
Это не только ты
Вы не первая мама, сталкивающаяся с этими эмоциональными взлетами и падениями. До 80% новоиспеченных матерей испытывают так называемый «бэби-блюз» — кратковременные упадки настроения, вызванные всеми изменениями, происходящими с новорожденным.
Эти ощущения часто возникают, когда вашему новорожденному всего 2 или 3 дня от роду, но вы, вероятно, почувствуете себя лучше к тому времени, когда вашему ребенку исполнится 1 или 2 недели.
Если ваше чувство грусти длится дольше или становится хуже, а не лучше, возможно, у вас так называемая послеродовая депрессия. Он более тяжелый и длится дольше, чем бэби-блюз, и им страдают около 10% женщин. У вас больше шансов на послеродовую депрессию, если у вас уже были приступы депрессии или если она встречается в вашей семье.
Как узнать, страдаете ли вы детской хандрой или послеродовой депрессией?
Когда это блюз
Ваше настроение быстро меняется от счастливого к грустному.В одну минуту вы гордитесь работой, которую выполняете в качестве молодой мамы. Затем вы плачете, потому что думаете, что не справитесь с задачей.
Вам не хочется есть или заниматься собой, потому что вы истощены.
Вы чувствуете раздражение, подавленность и тревогу.
Послеродовая депрессия
Вы все время чувствуете безнадежность, грусть, бесполезность или одиночество и часто плачете.
Вы не чувствуете, что делаете хорошую работу как молодая мама.
Вы не привязываетесь к своему ребенку.
Вы не можете есть, спать или заботиться о ребенке из-за переполняющего вас отчаяния.
У вас могут быть приступы тревоги и паники.
Как лечить бэби-блюз
Вы почувствуете себя лучше, если будете делать то, что нужно вашему телу в это напряженное время.
Спите столько, сколько можете, и отдыхайте, когда ваш ребенок спит.
Ешьте полезные продукты. Вы почувствуете себя лучше со здоровым топливом в вашей системе.
Прогуляться. Упражнения, свежий воздух и солнце могут творить чудеса.
Принимайте помощь, когда ее предлагают.
Расслабься. Не беспокойтесь о делах. Просто сосредоточьтесь на себе и своем ребенке.
Как лечить послеродовую депрессию
Возможно, вы никому не захотите говорить о том, что чувствуете депрессию после рождения ребенка. Но лечение может помочь вам снова почувствовать себя собой, поэтому важно быстро обратиться за помощью.
Если у вас есть симптомы послеродовой депрессии или хандра не проходит через 2 недели, немедленно обратитесь к врачу.Не ждите 6-недельного осмотра.
Ваш врач может прописать брексанолон (Zulresso), новую синтетическую версию гормона аллопрегнанолона, который доказал свою эффективность в облегчении симптомов послеродовой депрессии. Они также могут предложить психологическую помощь или прием антидепрессантов для лечения ваших симптомов.
PND и PP – Клиническая психология – Борнмут
Ответьте на ОДИН вопрос из РАЗДЕЛА A
Критически оцените данные, показывающие, как плохое послеродовое психическое здоровье может
повлиять на мать, ее ребенка и отношения между матерью и ее
ребенка.
Психическое здоровье матери и ее повседневное функционирование могут быть нарушены в послеродовом или послеродовом периоде. Объяснение этому состоит в том, что рождение ребенка считается значительным жизненным событием и связано с серьезными изменениями в образе жизни, такими как смена ответственности (Cristescu, Behrman, Jones, Chouliaras, & Ebmeier., 2015). Плохое послеродовое
психическое здоровье возникает, когда их способность адаптироваться к изменениям образа жизни нарушена и
потребности в уходе затруднены или не удовлетворены (Postnatal Mental Health Conditions, 2021).
Примером послеродового психического расстройства является послеродовая депрессия (ПНД), встречающаяся у 10%
молодых мам (O’Hara & Swain, 1996). PND классифицируется как плохое настроение и отсутствие удовольствия в
занятиях, которые ранее доставляли удовольствие, но может дополнительно включать усталость или низкую концентрацию
(American Psychiatric Association, 2013). Хотя диагноз аналогичен большому депрессивному расстройству
(БДР), симптомы ПНР должны сохраняться в течение как минимум четырех недель после рождения
(O’Hara, 1997).Более того, постнатальный психоз (ПП) может развиться после родов, поражая 1
на 1000 матерей (VanderKruik et al., 2017), и характеризуется бредом,
галлюцинациями и дезорганизованной речью, присутствующими в течение одного месяца (Американская психиатрическая ассоциация). ., 2013)
и может привести к серьезным последствиям, таким как детоубийство.
Плохое послеродовое психическое здоровье, такое как ПНД, может повлиять на благополучие матери и
качество жизни. Матери с ПНР могут быть ошеломлены переходом к материнству, и у
может развиться негативное восприятие их родительских способностей по сравнению с социальными стандартами (Li,
Yang & Xie., 2020), что может вызвать у них сильное чувство стыда или вины за то, что они
недостаточно хорошо заботятся о своем ребенке. Например, Данфорд и Грейнджер (2017)
провели перекрестное исследование для изучения взаимосвязи между стыдом и PND
с участием 183 матерей из Великобритании с использованием Теста самосознательного аффекта (TOSCA) для измерения
уровень стыда. Результаты показали положительную связь между чувством стыда и
симптомами послеродовой депрессии у матерей.Использование TOSCA повышает достоверность исследования
. Это связано с тем, что вопросы связаны с повседневной жизнью и облегчают ее участникам.
Послеродовой психоз | Postpartum Support International (PSI)
Послеродовой психоз — редкое заболевание, по сравнению с показателями послеродовой депрессии или тревоги.
Встречается примерно в 1–2 случаях на 1000 родов, или примерно в 0,1–0,2% родов. Начало обычно внезапное, чаще всего в течение первых 2 недель после родов.
Симптомы
Симптомы послеродового психоза могут включать в себя:
заблуждение или странные убеждения
галлюцинаций (видя или слухи, которые там нет)
Чувствительность Очень раздраженное
Гиперактичность
Снижение необходимости или неспособность сон
Паранойя и мнительность
Резкие перепады настроения
Трудности в общении
Наиболее значимыми факторами риска послеродового психоза являются личный или семейный анамнез биполярного расстройства или предшествующий психотический эпизод.
Исследование показало, что среди женщин, у которых развивается послеродовой психоз, примерно 5% самоубийств и 4% детоубийств связаны с этим заболеванием. Это происходит потому, что женщина, страдающая психозом, переживает отрыв от реальности. В ее психотическом состоянии бредовые идеи и убеждения имеют для нее смысл; они кажутся ей очень реальными и часто религиозны. Немедленное лечение женщины, страдающей психозом, является обязательным.
Также важно знать, что многие пережившие послеродовой психоз никогда не испытывали бредовых идей, содержащих насильственные команды.Заблуждения принимают разные формы, и не все из них разрушительны. Большинство женщин, переживающих послеродовой психоз, не причиняют вреда ни себе, ни другим. Тем не менее, всегда существует риск опасности, поскольку психоз включает бредовое мышление и иррациональные суждения, и именно поэтому женщины с этим заболеванием должны быть быстро обследованы, пролечены и тщательно обследованы квалифицированным специалистом в области перинатального психического здоровья.
Послеродовой психоз носит временный характер и поддается лечению с помощью профессиональной помощи, но это экстренная ситуация, и вам необходимо получить немедленную помощь.Если вы чувствуете, что вы или кто-то из ваших знакомых может страдать от этой болезни, знайте, что это не ваша вина и вы не виноваты. Немедленно позвоните своему врачу или на горячую линию экстренной помощи, чтобы получить необходимую помощь.
PSI также имеет координатора послеродового психоза для оказания дополнительной помощи женщинам и семьям, которые не находятся в чрезвычайной ситуации.
Джина Гердин
617-918-7659 (звонок или текст)
[email protected]
Эмбер Пайлз
281-231-8593 (звонок или текст) [email protected]
Феличе Редди
919-213-0537 (звонок или сообщение)
[email protected]
Группа онлайн-поддержки
PSI создала группу поддержки в режиме онлайн для переживших ППС.